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- CAS：41085-99-8
- 分子式：C59H97ClN2O4
- 分子量：933.9
- 纯度：≥98%
基本信息-
中文名称DiI(细胞膜橙色荧光探针)
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中文别名DiI荧光染料
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英文名称DiI
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英文别名1,1-Dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethylindocarbocyanine iodide
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CAS41085-99-8
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分子式C59H97ClN2O4
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分子量933.9
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性状深红色固体
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Ex/Em (MeOH)549/565 nm
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溶解性可溶于乙醇、DMF、DMSO
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保存温度-20℃
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有效期1年
产品简介DiI即DiIC18(3)，全称为 1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'tetra-methylindocarbocyanine perchlorate，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。常与DiA一起用于细胞膜双色标记。DiI作为示踪剂或长期示踪剂(long-termtracer)，可以被广泛用于正向或逆向、活的或固定的神经等细胞或组织。DiI通常不会影响细胞的生存力(viability)。被Di 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周，在体内可以长达一年。DiI在被固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6 mm/day，在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day。DiI除了用于细胞膜荧光标记外，还可用于检测细胞的融合和粘附、发育或移植过程中细胞的迁移，通过FRAP（光脱色荧光恢复技术）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiI染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用 0.1%TritonX-100 透化）后，也可以很好地进行质膜染色。
操作步骤（仅供参考）一、染色液制备
1. 配制储液：储液用无水DMSO或EtO 配制，浓度1~10 mM。注：未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融。
2. 工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS 或 PBS）稀释储液，配制浓度为1~10μM的工作液。注：工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始最优浓度的摸索。
二、悬浮细胞染色
1. 加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2. 37℃孵育细胞5~20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20 min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。
3. 孵育结束，1000~1500 rpm离心5min。倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
4. 重复步骤（3）两次以上。
三、贴壁细胞染色
1. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2. 从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，但要使表面保持湿润。
3. 在盖玻片的一角加入100μL 的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4. 37℃孵育细胞5~20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。
5. 吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2~3 次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5~10min，然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。
四、结果检测
样品可在培养基中进行检测，可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析。
注意事项1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. DiI 染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准
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