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- CAS：362596-00-7
- 分子式：C67H103ClN2O3S
- 分子量：1052.1
- 纯度：≥98%
基本信息-
中文名称DiD(细胞膜红色荧光探针)
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CAS362596-00-7
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分子式C67H103ClN2O3S
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分子量1052.1
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性状Soild
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溶解度Soluble in DMSO ≥5mg/mL
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纯度≥98%
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保存温度-20℃
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有效期2年
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应用细胞膜荧光染料、神经元顺行和逆行示踪、细胞长期示踪
产品简介DiD染料是亲脂性荧光染料家族成员之一，它可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当DiD与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiD（远红色荧光）可以用来对活细胞进行成像和流式分析。DiD可以用 633nm He–Ne激光器激发，有着比DiI（一种常见的细胞荧光染料）更长的激发波长和发射波长，在细胞和组织染色中更有价值。DiD染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用0.1% TritonX-100透化）后，也可以很好地进行质膜染色。
DiD染色固定的细胞或组织样品时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
操作步骤（仅供参考）制备储存液
用DMSO配制1~10 mM的储备液。如：1mg DiD粉末溶于0.9505 mL DMSO中，得到1mM的DiD储备液。
注：a.未使用的储存液建议分装储存在-20℃，避免反复冻融。b.吸湿的DMSO对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的DMSO。
工作液的配制
用合适的缓冲液（如：无血清培养基或PBS等）稀释储液，配制成1~10 μM的工作液。
注：a. 工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。b. 发现较难溶解时可以适当超声处理以促进溶解。c. 请根据实际情况调整工作液浓度，且现用现配。
悬浮细胞染色
1. 加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2. 37℃孵育细胞 5~20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。
3. 孵育结束，1000~1500 rpm离心5min。倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
4. 重复步骤（3）两次以上。
贴壁细胞染色
1. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2. 从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，但要使表面保持湿润。
3. 在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4. 37℃孵育细胞5~20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20 min 作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记效果。
5. 吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2~3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5~10min，然后吸干培养基。但要使表面保持湿润。
结果检测
样品可在培养基中进行检测，可通过荧光显微镜成像或流式细胞仪分析
注意事项1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
3. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
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