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海水鱼外周血淋巴细胞分离液试剂盒  Cite:0    分享

货号: SP1038
复制产品信息
规格:
200ml
单位:
单价:¥1000.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    海水鱼外周血淋巴细胞分离液试剂盒
  • 保存温度
    室温 避光
  • 有效期
    2年
产品简介

本产品是一种用于分离动物外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血细胞的密度差异,通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将淋巴细胞从外周血中分离出来。适用于从动物抗凝血液中分离淋巴细胞,无菌条件下分离的淋巴细胞可用于培养。

产品组成

各种动物外周血淋巴细胞分离液.....200mL
全血及组织稀释液..............................200mL
细胞洗涤液...........................................200mL
无菌硅化管...........................................10mL x 5支

操作步骤(仅供参考)

1. 取新鲜抗凝全血(EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝均可)或者去纤维蛋白血液,用等体积的全血及组织稀释液或者 PBS 稀释全血。
2. 在离心管中加入适量分离液(当稀释后血液体积小于 3mL 时,加入 3mL 分离液;大于等于 3mL,加入等体积分离液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果),将稀释后的血液平铺到分离液液面上方,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后将血液小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。如果样品较多加样时间较长,在离心之前出现红细胞成团下沉属正常现象。)ed_1779759388629065.png
3. 室温,水平转子 500~1000g,离心 20~30min(血液的体积越大所需的离心力越大,离心时间越长,最佳的分离条件需摸索,离心转速最大不超过 1200g。)
4. 离心后将出现明显的分层:最上层是稀释的血浆层,中间是透明的分离液层,血浆与分离液之间的白膜层即为淋巴细胞层,离心管底部是红细胞与粒细胞。
5. 小心的吸取白膜层细胞到 15mL 洁净的离心管中,10mL PBS 或细胞洗涤液洗涤白膜层细胞。250g,离心 10min。
6. 弃上清,加入 5mL 细胞清洗液重悬细胞,250g,离心 10min。
7. 弃上清,重悬细胞备用。

注意事项

1. 本试剂盒所提供的无菌硅化离心管(YA5500)不建议重复利用,可用普通的 15mL 无菌离心管替代。
2. 开封前颠倒混匀,本分离液为无菌产品,为延长分离液保存时间,请在无菌条件下启封,避免微生物污染。
3. 分离液使用时应始终保持室温(18℃~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心,可能会导致白膜层不清晰。
4. 血液样本最好为新鲜抗凝血(采血 2h 以内),为保持细胞的活性,应避免冷冻和冷藏。
5. 稀释血液或洗涤细胞,不可使用含 Ca、Mg 离子的缓冲液及培养液,其成分会导致血细胞凝集,大大降低细胞得率及纯度。
6. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其带有的静电作用,可能会导致细胞挂壁,影响分离效果。
7. 血液样本的粘稠度或者是温度差异,可能会影响分离效果,可以调节离心转数和离心时间,摸索最佳 的分离条件。
8. 吸取过多的细胞层及分离液层会导致分离液交界处的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加;吸 取过多的血浆层可能会导致细胞中血浆蛋白及血小板污染。 I. 如果要进一步对分离的细胞进行培养,注意全程保持无菌操作,避免微生物污染。
9. 不同动物血液在不同比重分离液中的细胞离散系数及细胞带电不同,用户在制定分离液时应提供所需 分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。

10. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

11. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

12. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。


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