本产品是一种用于分离人外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血细胞的密度差异（淋巴细胞和单核细胞的密度介于1.075~1.090 g/mL之间，红细胞和粒细胞的密度为 1.092 g/mL 左右，血小板为 1.030~1.035 /mL 之间），通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将淋巴细胞从人外周血或脐带血中分离出来。

本产品最佳使用环境为正常大气压，温度为 20℃±2℃，否则会影响质量。
一、 通用实验方法
1．取 2mL 新鲜抗凝(EDTA、枸橼酸钠或肝素等抗凝剂均可)全血，用等体积等渗溶液(PBS 或生理盐水)稀释全血。
2．在离心管中加入一定体积的分离液，将稀释后的血液小心加入，使其平铺到分离液液面上方，保持量液面界面清晰。分离液、抗凝未稀释全血、等渗溶液(PBS 或生理盐水)的体积比为 2:1:1。
3．室温条件下，以400~500g离心(水平转子)离心30~40min。
4．离心结束后，离心管中由上至下细胞分四层。第一层为血浆层(含血小板)，第二层为环状乳白色白膜层，即单个核细胞层(包含单核细胞和淋巴细胞)，第三层为透明分离液层，第四层为红细胞层(含大量中性粒细胞)，小心吸取白膜层至新的离心管中。
5．用 3 倍体积的等渗溶液(PBS、生理盐水或培养基等)轻柔混匀细胞后，以250g离心10min，弃上清。重复洗涤 1~2 次。
6．用等渗溶液(PBS、生理盐水、培养基等)将细胞重悬，用以细胞计数。
为满足客户实际使用需求，根据不同血液样本量推荐具体实验操作方法如下：
二、 使用15mL离心管时：
情况 A：血液样本量小于3mL时，实验方法如下：
1．取一支15mL离心管，加入3mL分离液。
2．用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，400~650g，离心20-30min(注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果)。
3．离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4．用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一个15mL离心管中，向所得离心管中加入10mL等渗溶液)，混匀细胞。
5．250g，离心 10min。
6．弃上清。
7．用吸管以5mL等渗溶液重悬所得细胞。
8．250g，离心 10min。
9．重复 6、7、8，弃上清后以0.5~1mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况 B：血液样本量为3-6mL时，实验方法如下：
1．取一支 15mL 离心管，先加入与血液样本等量的分离液。
2．用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，450~650g，离心20-30min(注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果，但最大离心力最好不超过1200g)。
3．离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4．用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15mL离心管中，向所得离心管中加入10mL等渗溶液)，混匀细胞。
5．250g，离心10min。
6．弃上清。
7．用吸管以5mL等渗溶液重悬所得细胞。
8．250g，离心10min。
9．重复 6、7、8，弃上清后以0.5~1mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
三、 使用 50ml 离心管时：
情况 A: 血液样本量为7-10mL时，实验方法如下：
1．取一支50mL离心管，先加入与未稀释的血液样本等量的分离液。
2．用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，500~950g，离心20-30min(注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果，但最大离心力最好不超过1200g)。
3．离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4．用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15mL离心管中，向所得离心管中加入10mL等渗溶液)，混匀细胞。
5．250g，离心10min。
6．弃上清。
7．用吸管以5mL等渗溶液重悬所得细胞。
8．250g，离心 10min。
9．重复 6、7、8，弃上清后以 0.5~1mL 后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况 B: 血液样本量为11-20mL时，
实验方法如下：1．取一支50mL离心管，先加入与未稀释的血液样本等量的分离液。
2．用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，500~1100g，离心20-25min(注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果，但最大离心力最好不超过 1200g)。
3．离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4．用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15mL离心管中，向所得离心管中加入10mL等渗溶液)，混匀细胞。
5．250g，离心10min。
6．弃上清。
7．用吸管以5mL等渗溶液重悬所得细胞。
8．250g，离心 10min。
9．重复 6、7、8，弃上清后以 0.5~1mL后续实验所需相应液体重悬细胞。
【检验结果的解释】
分离正常人外周血，每毫升全血可获得的单个核细胞数应≥0.5×10⁶个。
【检验方法的局限性】
本产品的分离效果受储存条件、环境温度、操作者的经验、样本质量、离心条件等因素影响。本分离液最佳环境为正常大气压、环境温度为 20±2℃。本分离液在低温时呈较高密度，在高温时呈较低密度。不同的地区可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离心时间，对离心转速进行调整。

1. 常温（18℃~25℃）避光保存，有效期2年
2. 无菌条件下启封后置于4℃保存，有效期6个月

1. 当血液样本粘度过高需要稀释时，最优稀释方法为血液样本与稀释液按1:1 比例进行稀释。不当的稀释方法会降低细胞得率及活性。
2. 因血液样本的个体差异及血液粘度不同，需调整离心力及离心时间，最大离心力不超过1000g。
3. 稀释血液或洗涤细胞时，不可使用含 Ca2+、Mg2+的缓冲液或培养基，否则会降低细胞得率或纯度。
4. 本产品最佳使用环境为正常大气压，温度为 20℃±2℃，否则会影响质量。
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

6. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

7. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。