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重组细胞因子溶解稀释液套装(Perotech专用)  Cite:0    分享

货号: S51010
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单价:¥280.00
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
peprotech细胞因子溶解稀释方法
产品简介

本细胞因子溶解稀释套装外观为无色澄清透明的液体,无明显异物,无菌,适用于细胞因子的溶解和 稀释,使用方便,操作简单,可高效溶解并稳定保存相应的细胞因子。请根据细胞因子说明书选择合适的 溶解液和稀释液,并严格按照说明书要求进行溶解、稀释、分装和冻存。

产品组成
组分名称规格

试剂A:溶解液
(溶解液为下列产品之一,用于相应细胞因子的溶解)

无菌超纯水1ml
磷酸钠缓冲液 5 mM pH 7.41ml
柠檬酸盐缓冲液 10 mM pH 3.01ml
醋酸溶液 100 mM1ml
Tris 缓冲液 5mM pH 7.61ml
1×PBS 缓冲液 pH 7.21ml
磷酸钠缓冲液 5 mM pH 7.21ml
磷酸钠缓冲液 5 mM pH 7.61ml
磷酸钠缓冲液 5 mM pH 7.81ml
5 mM HCl (pH 3.0)1ml
磷酸钠缓冲液 10 mM pH8.01ml
磷酸钠缓冲液 10 mM pH7.51ml

试剂B:稀释液
(稀释液用于重溶细胞因子的稀释 ,瓶标为10ml,实验时请以实际量取为准)

PBS 缓冲液 (含 5%海藻糖) pH7.210ml


操作步骤(仅供参考)

1. 使用前将套装中的试剂恢复至室温。
2. 细胞因子蛋白开盖前以10,000 - 12,000 rpm离心30 - 60秒或3,000 rpm离心5-10分钟,加入适量说明书指定的溶解液,严格按照说明书所述方法进行溶解,不可涡旋振荡。
3. 重溶后的细胞因子短期保存:2-8℃保存一周;长期保存:加入适量稀释液进行稀释,终浓度不低于10 μg/ml,轻轻吹吸混匀,分装冻存于-20℃或-80℃。

注意事项

1. 不同产品、甚至不同生产批次的同一产品,溶解方法可能有所不同。在使用前,请核实套装中的溶解液和稀释液与细胞因子说明书中指定的溶解液和稀释液相一致。
2. 溶解分装细胞因子时,请在超净台中无菌操作,避免污染。
3. 试剂包装如有破损或渗漏,请勿使用。
4. 反复冻融会使蛋白变性,从而导致细胞因子活性降低或丧失。推荐分装后冻存,每管够一次使用,避免反复冻融。
5. 本细胞因子溶解稀释套装适用于 PeproTech细胞因子(普通蛋白和无动物成分蛋白),其他厂商的细胞因子溶解和稀释可能也适用。 

6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

7. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

8. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。


peprotech细胞因子溶解稀释方法

一、查看说明书

1 确定合适的溶解液
收到产品后,首先应查看说明书中细胞因子储存和处理的方法。见下图:
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2 确定合适的温度

图中的表格给出了细胞因子在冻干粉(lyophilized)状态下的溶解(reconstituted)和稀释(extended storage)的储存温度以及时间,您可以根据自己的实际需要选择。

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二、溶解

1 离心

细胞因子为冻干粉,开盖前10000-12000rpm离心30s。

2 溶解

根据说明书红色标识地方的描述,选择合适的溶解液,溶解到后边的浓度范围内。如此可以确保蛋白充分溶解复性,保证产品质量。请不要使用非建议溶液溶解。

目的:使细胞因子从无活性的冻干粉状态充分溶解复性成为有活性的蛋白溶液。

注意:不要用涡旋振荡仪剧烈涡旋,可以用枪头轻轻吹打几次助溶。有的细胞因子溶解比较慢,需要在室温静置或者摇床低速摇一段时间使充分溶解。

3 短期储存

溶解后的蛋白溶液可以在2-8度储存1周。

4 长期储存

如果您的实验,一周内不能用完。必须将第2步中获得的溶液用含载体蛋白的溶液进一步稀释。

目的:对溶解的蛋白溶液进行稀释冻存。加入载体蛋白可以封闭掉管壁上的蛋白结合位点,且可以在低温下维持细胞因子的稳定。

三、稀释

1. 配制

配制0.1%BSA或者10%FBS或者5%海藻糖的稀释液备用(确保无菌),这三种稀释液的配制的Buffer可以用PBS或者细胞基础培养基。使用以上三种稀释液的任意一种稀释重悬的蛋白溶液,稀释浓度根据您的使用浓度确定,不要低于10ug/ml。即可分装成小管,冻存在-20—-80度。

2.使用方法

使用时取用一支冻存的细胞因子,加入到您的培养基中至使用浓度。细胞因子应避免反复冻融。

四、FAQ

Q1:为什么会有这么多种溶解方法?

A:蛋白的溶解性与很多因素有关,其中比较重要的是pH值和离子强度。PeproTech的细胞因子或重组蛋白在出厂前均经严格测试,说明书上所标明的溶解液是能够将该细胞因子或重组蛋白完全溶解的液体。如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符,很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能完全溶解或者根本无法溶解,这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。

Q2:高于或低于该浓度范围会有什么问题呢?

A:首先,细胞因子或蛋白会不稳定,即很容易出现活性下降的现象。其次,高于这个浓度范围,可能会超过该蛋白的最大溶解浓度,即蛋白无法完全溶解。再者,高于或低于该浓度范围,蛋白可能会出现聚集(aggregation),最终结果还是部分蛋白未溶解,导致蛋白活性的减弱。

Q3:若想保证溶解液与冻干粉充分混匀,以实现细胞因子或重组蛋白的完全溶解,该怎么办呢?

A:多数细胞因子或重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的,一般我们用移液枪的枪头轻吹几下,即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。对于不易溶解的细胞因子或蛋白,PeproTech会在说明书中进行备注(Note),

五、溶解稀释套装

本公司细胞因子溶解稀释套装外观为无色澄清透明的液体,无明显异物,无菌,适用于细胞因子的溶解和稀释,使用方便,简单操作,可高效溶解并稳定保存相应的细胞因子。

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