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Wheathley三色染色试剂盒  Cite:0    分享

货号： S51633
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  • 用途：用于寄生虫的永久制片染色，原虫滋养体的胞质染成蓝绿色或淡紫色，包囊染成更淡的紫色，胞核和内含物呈红色，背景呈绿色
规格:
3X50ml
单位:
盒
单价:￥600.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    Wheathley三色染色试剂盒
  • 保存温度
    室温 避光
  • 有效期
    1年
  • 应用
    用于寄生虫的永久制片染色，原虫滋养体的胞质染成蓝绿色或淡紫色，包囊染成更淡的紫色，胞核和内含物呈红色，背景呈绿色
产品简介

临床寄生虫检验主要是从临床标本中检出寄生虫并进行鉴定，为临床诊断、治疗、预防和流行病学调查提供可靠的依据。检获寄生虫病原体是确诊寄生虫感染的依据，也是目前主要的检查方法。有些寄生虫病因难以检获病原体，可采用免疫学或分子生物学方法辅助诊断。
类便样本是实验室诊断寄生虫感染的最常见样本，可以通过直接涂片法、浓集法及永久染色涂片三个独立的步骤对每个样本进行检查。直接涂片法要求新鲜粪便，可以检获活动的原虫滋养体、原虫包囊、蠕虫虫卵和幼虫；浓集法可提高原虫包囊、球虫卵囊、微孢子虫孢子及蠕虫虫卵和幼虫的检出率，有沉淀法和浮聚法；永久染色涂片更易于进行肠道原虫的鉴定。其中，永久染色法可对湿片中发现的可疑物进行确认，以及鉴定在湿片中未发现的原虫。其他的来自肠道的样本如十二指肠吸取物或引流液，肠检胶囊法获得的黏液，乙状结肠镜获得的样本也可用永久染色法检查原虫。多种染色方法可用，最常用的是铁-苏木素染色法和Wheathley 三色染色法。
本品Wheathley 三色染色试剂盒即 Wheatley Trichrome Stain，又称作惠特利三色染色试剂盒，最初由 Gomori 开发并用于染色组织切片和细胞涂片。1951 年，Wheatley 通过添加固定和脱水过程改进了 Gomori 的技术，形成了一种简单、快速的肠道变形虫和鞭毛虫染色程序。Chromotrope 2R 可将核染色质、染色质、核体、寄生虫卵和幼虫、细菌以及吞噬的红细胞染为红紫色；淡绿或固绿染料可将包囊、滋养体和其他细胞成分的细胞质染成蓝绿色。本产品常用于从粪便样本中检测、鉴定和区分肠道原生动物与背景材料。

产品组成
组分3×50ml保存温度
试剂(A): 碘酒溶液50mlRT 避光
试剂(B): Wheathley 染色液50mlRT 避光
试剂(C): 乙酸分化液50mlRT


操作步骤（仅供参考）

自备材料
1. PVA 固定液或肖氏液(Schaudin 溶液)、70%乙醇、95%乙醇、无水乙醇
2. 二甲苯或环保脱蜡透明液、中性树胶、蒸馏水
3. 加热器、显微镜、涂抹棒或刷子、吸水纸、载玻片、盖玻片
操作步骤(仅供参考)
1. 涂片制备：PVA 保存的粪便标本必须固定至少 30 分钟。新鲜的实验室标本应与PVA（1份粪便对 3 份固定液）混合并固定 30 分钟。
2. 彻底混合标本和 PVA，将少量溶液倒在一张纸巾上以吸收多余的固定液。
3. 使用涂抹棒、移液器或刷子将一些粪便材料从纸巾转移到两个干净的载玻片上。将混合物涂抹到载玻片的边缘，以确保标本在染色过程中粘附在载玻片上。涂片厚度以透过玻片可以看到书上(报纸)的字迹为宜。
4. 让涂片在 35-37℃下干燥 1 小时或在室温下干燥过夜。涂片也可以在加热器上以60°C热固定直至干燥（约 4 分钟）。
5. 配制碘酒工作液：碘酒溶液由过饱和的碘和 70%乙醇配制而成的为黑色浓缩溶液，使用前，用 70%乙醇稀释浓缩液，使外观呈浓茶色或深红棕色(琥珀色)时即可使用。当颜色符合要求时不必更换碘酒工作液，更换时间取决于染片数量和容器大小。
6. 涂片处理：使用非汞固定剂保存的标本不需要用碘酒工作液处理。
①非汞基固定剂固定的新鲜样本：将玻片放入 70%乙醇中放置 5 分钟。
②汞基固定剂固定的新鲜样本：先将玻片放入 70%乙醇中放置 5 分钟，然后浸入碘酒工作液中脱汞处理 1 分钟，再将玻片依次放入 70%乙醇(Ⅰ)和 70%乙醇(Ⅱ)中各5 分钟。
③汞基固定剂 PVA 固定的风干的样本：先将玻片浸入碘酒溶液中脱汞处理5~10 分钟，再将玻片依次放入 70%乙醇(Ⅰ)和 70%乙醇(Ⅱ)中各 5 分钟。
7. 将玻片置于 Wheatley 染色液中静置染色 10 分钟。
8. 将玻片放入乙酸分化液中分化 1~3 秒。分化时间不得超过 3 秒。
9. 95%乙醇中浸提载玻片 5~10 次，再将玻片依次放入无水乙醇(Ⅰ)和无水乙醇(Ⅱ)中各3分钟，二甲苯(Ⅰ)和二甲苯(Ⅱ)中各 5~10 分钟。
10. 滴加中性树胶或环保封片胶，封片。室温下过夜干燥或在 35~37℃干燥一小时。
11. 使用油镜，在显微镜下检查载玻片的核细节。至少需要检查 200-300 个油镜场。
染色结果

  原虫滋养体的胞质  带紫色调的蓝/绿色，有时呈淡紫色
  包囊细胞质  带紫色调的蓝/绿色，有时呈更淡一些的紫色
  核染色质、染色体、细菌、棱锥体、吞噬的红细胞  红色-紫红色
  小孢子孢子  红色-粉红色
  背景  绿色


注意事项

1. 碘酒溶液为过饱和溶液，瓶底可能有碘颗粒物，为正常现象。当碘酒溶液不够用时，可加入 70%乙醇，再次溶解碘颗粒，使溶液成深黑色时即可使用。
2. 配制的碘酒工作液需避光保持。
3. 每个粪便样本都是传染性物质的潜在来源，使用后，必须对标本、容器和测试材料进行适当灭菌，以防止微生物危害的威胁。
4. 乙酸分化液为含 0.5~1%乙酸的酒精溶液，如需要量大，可自行配制。
5. 如果 Wheathley 染色液由深蓝色变成紫色或过期，则不应使用并应妥善处理。
6. 碘酒和乙酸分化液易挥发，使用后应及时拧紧瓶盖。
7. 试剂可能会刺激眼睛、皮肤和呼吸道。

8. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
9. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

10. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

11. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

 

备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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