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产品名称普鲁士蓝染色试剂盒(伊红法)
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保存温度室温 避光
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有效期1年

普鲁士蓝反应(Prussian Blue Reaction)是一种对含有颗粒铁的细胞或组织中的非血红素铁(含铁血黄素、铁转运蛋白、铁沉积等)进行染色的方法,在缺血性贫血、溶血性贫血、血色素沉着症和血色素代谢异常等疾病验证方面起重要作用。该染色方法可以区分含铁血黄素和其他色素,但是受限于染色原理,只适用三价铁离子含量较多的组织和细胞染色,联合其他增强试剂可用于铁死亡的检测。
普鲁士蓝反应最早被 Perls 提出,因此最常被称为 Perl 铁染色,但是自1867 年提出以来有众多化学家和病理学家对该反应进行优化,其中优化比较完善使用也比较多的一种称为Lillie 法,能够对二价铁和三价铁进行分别标记。本试剂盒即为即用型的 Lillie 法三价铁染色试剂盒,采用优质原料配制,试剂稳定,染色特异性良好。

组分 | 2×50mL | 2×100mL | 保存温度 | |
试剂(A):Perls染色工作液 | A1:Perls 染色液 A | 25mL | 50mL | 室温 避光 |
A2:Perls 染色液 B | 25mL | 50mL | 室温 | |
临用前,取 A1、A2 等量混合,即为 Perls stain,不宜提前配制 | ||||
试剂(B): 伊红染色液 | 50mL | 100mL | 室温 避光 |

自备材料
固定液(见注意事项 2)、系列乙醇 、蒸馏水
操作步骤(仅供参考)
1. 组织推荐固定于中性福尔马林固定液(10%)中,常规脱水包埋。(见注意事项2)
2. 石蜡切片推荐厚度 5μm,常规脱蜡至水。冰冻切片推荐厚度 10μm,常规复温复水。
3. 切片滴加 Perls 染色工作液染色 15~30min,蒸馏水冲洗 2~5min。(见注意事项4)
4. 滴加伊红染色液覆盖切片染色 15~30s,蒸馏水快洗 1~5s。
5. 75%/85%/95%乙醇快速脱水,每级 2-3s,无水乙醇脱水两次,每次 30s,二甲苯透明,中性树胶封片。
染色结果
1. 含铁血黄素或铁蛋白中的三价铁:蓝色
2. 组织背景:红色
对照(可选)
取相同对照切片脱蜡至水,1%盐酸水溶液室温处理 20min 后正常染色。结果为染色阴性。
取少量铁盐配成不同浓度的水溶液试样(常用 0.1%氯化铁或硫酸铁水溶液),滴入一滴染色工作液应观察到明显蓝色沉淀出现,结果为试剂阳性。
取少量亚铁盐配成不同浓度的水溶液试样(常用 0.1%硫酸亚铁水溶液),滴入一滴染色工作液应观察到无明显变化或有微量变色,结果为试剂阴性。

1. 石蜡切片脱蜡应充分,系列乙醇应及时换新。
2. 该染色法组织取材应避免使用酸性固定液或螯合剂处理导致铁离子丢失,推荐使用F13233-中性福尔马林固定液(10%)或S51102-4%组织细胞固定液进行组织固定。
3. 整个操作过程中须避免铁离子污染,清洗用水以蒸馏水为宜,因自来水常内含铁质。
4. 该染色对铁含量有要求,染色前建议进行使用脾脏石蜡切片或铁盐进行对照染色确定试剂有效性。
5. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
7. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
8. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。