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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称酵母原生质体制备试剂盒
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保存温度2-8℃
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有效期1年
产品简介酵母原生质体制备试剂盒提供全套试剂，适用于从各种酵母样本制备原生质体。此试剂盒提供了一个系统，维持原生质体是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离原生质体，而绝少交叉污染。
本试剂盒提取的原生质体组分仍保持其生化功能，适合各种下游分析。
本试剂盒不适用冷冻酵母样本的原生质体制备。
产品组成| 名称 | 50T | 100T | 保存 |
| 组分 A：酵母原生质体制备液 A | 20ml | 40ml | 2-8℃ |
| 组分 B：酵母原生质体制备液 B | 25ml | 50ml | 2-8℃ |
| 组分 C：原生质体保存液 C | 20ml | 40ml | 2-8℃ |
1. 试剂B长期不用时-20℃储存。避免反复冻融。2. 可以根据需要分装后使用。3. 试剂拆封后请尽快使用完！
操作步骤（仅供参考）自备试剂和仪器
离心机、振荡器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒、PBS缓冲液、离心管、吸头、一次性手套
使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
酵母原生质体制备
1. 酵母培养物，在 4℃，5000×g 条件下离心 5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
2. 用 PBS 洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。注：用 2000xg 力离心 5 分钟。
3. 每100μl体积或100mg湿重酵母沉淀物中加入 400μl酵母原生质体提取液A，混匀后，在30℃条件下保温15分钟。
注：酵母数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整
4. 在 2000×g 条件下离心 5-10 分钟，收集酵母沉淀。
5. 用 PBS 缓冲液洗涤酵母一次，离心收集菌体。
6. 酵母沉淀物中加入 500μl 酵母原生质体提取液 B，充分混匀。注：根据酵母细胞量调整提取液用量，一般加菌体体积的 2-5 倍均可。按酵母菌体体积每 100μl 或 100mg 湿重菌体加入 250-500ul 提取液。
7. 在 37℃或室温条件下轻微振荡 60 分钟-2 小时。
注：使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔 10 分钟用移液器吹打混匀。不同酵母样品试剂 B 处理时间不同，一般 60 分钟即可。
8. 在 2000×g 条件下离心 5-10 分钟，弃上清，收集沉淀。
9. 沉淀用 PBS 缓冲液洗涤一次。
10. 离心收集沉淀，即得到酵母原生质体样品。
11. 将酵母原生质体样本用试剂 C 重悬。
注：也可不用试剂盒所配的试剂 C，用其他适当缓冲液重悬或直接用于下游实验。
12. 置冰箱备用或直接用于下游实验。
注意事项1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
