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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称植物核DNA大量提取试剂盒
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保存温度按试剂盒各组分温度保存
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有效期6个月
产品简介从植物组织中制备基因组 DNA 较常采用的方法有氯化离心法、CTAB 抽提法等，CTAB抽提法是经典且迅速的植物 DNA 提取法，可以用于多种不同类型植物样品中DNA的提取，获得的量很高但纯度一般，但是足够用于大多数分子生物学实验。
本品植物核DNA大量提取试剂盒是简单快速简便的提取植物核中DNA的试剂盒，先将新鲜植物样本研磨破碎细胞壁，采用差速离心法分离出细胞核并将其破碎，再用CTAB抽提液提取出核 DNA，本法制备量大，所提 DNA 可供进一步纯化及基因转化使用。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成| 组分 | 50T | 保存温度 |
| 试剂(A): 核分离缓冲液 | 500ml | 2-8℃ |
| 试剂(B): 核冲洗缓冲液 | 100ml | 2-8℃ |
| 试剂(C): 核储存缓冲液 | 20ml | 2-8℃ |
| 试剂(D1): 核裂解缓冲液 | 10ml | 2-8℃ |
| 试剂(D2): 蛋白酶 K 溶液(20mg/ml) | 0.5ml | -20℃ 避光 |
| 试剂(E1): CTAB 抽提液 | 10ml | 室温 |
| 试剂(E2): 2-ME | 0.5ml | 室温 避光 |
| 试剂(F): 蛋白沉淀剂 | 30ml | 2-8℃ 避光 |
| 试剂(G): CTAB 溶液(10%) | 2ml | 室温 |
| 试剂(H): DNA 沉淀液 | 50ml | 室温 避光 |
| 试剂(I): DNA 洗涤液 | 50ml | 室温 |
| 试剂(J1): TE Buffer | 10ml | 室温 |
| 试剂(J2): RNase A(10mg/ml) | 0.1ml | -20℃ |
| 试剂(K): 乙酸铵溶液(7.5M) | 5ml | 2-8℃ |
操作步骤（仅供参考）自备材料
1. 液氮、研钵或匀浆器、离心机、离心管、冰箱、恒温箱或水浴锅
2. 二乙醚、异丙醇
操作步骤(仅供参考)
(一)样品处理及分离细胞核
1. 称取 10g 幼叶样本或 8g 愈伤组织等，置烧杯中，于通风橱中加入预冷的二乙醚，浸没材料，摇晃 1~2min，倾出二乙醚，预冷的水冲洗样本。
2. 用刀片去除叶脉，并分割成小块，转入匀浆器或研钵中，加入预冷的20ml 的核分离缓冲液，中速匀浆 1~3min，用 4 层无菌平纹细布和 1 层 Miracloth 过滤匀浆至离心管。
3. 500r/min 4℃离心 10min，弃上清，沉淀用 1~1.3ml 核冲洗缓冲液悬浮，再用500r/min4℃离心 10min(重复 2~3 次），使细胞核与细胞碎片分离，收集细胞核样品，细胞核可悬浮于核储存缓冲液中，-70℃保存。
(二)细胞核破碎及DNA提取
1. 配制核裂解液：按核裂解缓冲液：蛋白酶 K 溶液=1ml：0.025ml 的比例混合即成。
2. 将上一步分离的核样品悬浮于 0.25ml 核裂解液中，37℃保温 30min；再向其中加入5ul2-ME 和 90℃预热 0.25ml CTAB 抽提液，立即混匀；再加入 0.5ml 的蛋白沉淀剂，温和地反复颠倒离心管，室温下 10000r/min 离心 10min，上清转入新的离心管。
3. 加入 1/10 体积的CTAB溶液(10%)[约 0.05ml]，再次加入等体积[约0.5ml]的蛋白沉淀剂，温和地颠倒混匀离心管，室温下 3500r/min 离心 10min，上清转入新的离心管。
4. 加入 1/2～2/3 体积预冷的DNA沉淀液，轻轻混匀，室温静置使核酸沉至管底，如果观察不到沉淀，可在室温下静置数小时至过夜。
5. 2000g 离心 2min，轻轻弃上清液，松散的DNA沉淀物置于小离心管中加入0.5~1mlDNA 洗涤液，室温静置 10min，4000r/min 离心 10min，收集沉淀，重复操作两次，清除CTAB。
6. 自然干燥 DNA，加入 20～50μl TE Buffer-RNase A 混合液（1ml+1ul），37℃保温1h，加入乙酸铵溶液(7.5M)使终浓度为 2.5M，并加入 2 倍体积的预冷无水乙醇，温和混匀，室温放置 10min。
7. 室温 15000r/min 离心 10min，收集沉淀，吹干保存，使用时溶于适量TE Buffer，-20℃保存。
注意：TE Buffer 体积越大，DNA 浓度越低。
注意事项1. 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2. 用于裂解植物组织或叶片越新鲜，裂解越好、收获量越大。
3. 二乙醚处理材料可促进角质层溶解及细胞破裂。
4. 提取过程中的机械力可使大分子 DNA 断裂，因此各步操作均应温和，避免剧烈震荡。
5. 使用到的器皿、离心管最好经过硅化处理。
6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
