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植物细胞核和细胞质提取试剂盒(酶法)  Cite:0    分享

货号: CK1028
复制产品信息
规格:
50T 100T
单位:
单价:¥1455.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    植物细胞核和细胞质提取试剂盒(酶法)
  • 保存温度
    2-8℃
  • 有效期
    1年
产品简介

■ 植物细胞核和细胞质提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核和细胞质。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的细胞核和细胞质不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。
■ 本试剂盒采用酶法提取,酶法提取制备的回收率提高,纯度高,保持天然活性,但是耗时较长。非酶法的提取试剂盒提取过程简单方便,速度快,可在1小时内完成,而且绝少交叉污染,但是回收率相比酶法较低。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒,对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。

产品组成
产品组分50T100T保存温度
试剂A:洗涤液 A25ml50ml2-8℃
试剂B:提取液 B25ml50ml2-8℃
试剂C:提取液 C25ml50ml2-8℃

1. 试剂盒2-8℃保存,开盖后组份按要求条件保存。
2. 试剂拆封后请尽快使用完!

操作步骤(仅供参考)

自备试剂和仪器
离心机、振荡器、涡旋混匀器、Dounce匀浆器、移液器、冰箱、冰盒,PBS缓冲液、离心管、吸头、细胞筛(100μm)、一次性手套。
一、使用注意事项
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂。
二、操作步骤
1. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的100-200mg植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎(也可用锋利的刀片划成尽可能小的碎片)。
2. 加入500μl 洗涤液A 充分混匀。
3. 在 30℃条件下静置 15 分钟。
4. 在2000×g条件下离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
5. 在沉淀中加入500μl提取液B,充分混匀。
【注】:
● 培养细胞1000×g 条件下离心5 分钟,小心吸
● 大约每300μl细胞压积中加入1ml提取液B。
● 根据实际样本体积调整提取液用量,一般试剂是样本体积的2-3倍,充分淹没样本即可。
6. 将提取液B样本悬液置振荡器上37℃-45℃或室温振荡24-72小时。
【注】:
● 使用振荡器/摇床的较低转速,提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可以不振荡,中间每隔几小时用移液器吹打混匀即可。
● 根据下游核和胞质的应用选择合适的温度,最高温度为55℃时制备速度最快。但是温度过高会影响样本活性,请根据下游应用选择温度。
● 不同类型的植物样本需要处理的时间差异较大。拟南芥较易处理,鲜嫩叶片较易处理,年龄小的样本处理时间短。
● 部分细胞壁较厚的植物类型可能需要处理更长时间。可以延长至72小时以上处理以提高得率。
7. 在2000×g离心5分钟,弃上清,收集沉淀。
【注】:
● 有条件的话最好用100μm细胞筛网过滤提取液 B 处理液后,收集滤液再离心。
● 没有细胞筛可以不过滤。
8. 用PBS 洗涤沉淀一次。
【注】: 在2000×g 离心 5 分钟
9. 在沉淀中加入500μl 试剂C重悬沉淀,充分混匀。用匀浆机/匀浆器匀浆。10、置 4℃振荡20-30分钟。
【注】:
● 使用振荡器/摇床的较低转速,提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可以不振荡,在 2-8℃静置,稍微延长处理时间,中间每隔几小时用移液器吹打混匀即可。
11. 在 4℃,800×g力条件下离心5 分钟。
12. 移除上清至另一干净离心管。上清为细胞质部分,沉淀为细胞核。
13. 用相应的缓冲液重悬细胞核沉淀,将两个样本置冰箱备用或直接用于下游实验。

注意事项

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

8. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

9. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。


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