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植物细胞核提取试剂盒(非酶法)  Cite:0    分享

货号: CK1026
复制产品信息
规格:
50T 100T
单位:
单价:¥1292.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤(仅供参考)
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    植物细胞核提取试剂盒(非酶法)
  • 保存温度
    2-8℃
  • 有效期
    1年
产品简介

■ 植物细胞核提取试剂盒适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的细胞核纯度高。
■ 本试剂盒提取的细胞核保持天然活性,可以用于功能研究等各种下游,也可以用于提取核蛋白。
■ 本试剂盒适合新鲜样本的细胞核提取,冻存样品由于核可能已经损伤破裂,回收率会降低。
■ 本试剂盒采用非酶法提取,提取过程简单方便,速度快,可在1小时内完成,而且绝少交叉污染,但是细胞核回收率相比酶法较低。酶法提取制备的植物细胞核,回收率稍有提高,但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒,对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒。请根据不同的需要选择试剂盒。
■ 本试剂盒提取得到的细胞核样本纯度大约为 90%。不建议用于蛋白质定位等下游应用。

产品组成
产品组分50T100T保存温度
试剂A:植物核提取液 A100ml200ml2-8℃
试剂B:植物核提取液 B25ml50ml2-8℃
试剂C:植物核保存液 C15ml30ml2-8℃


操作步骤(仅供参考)

自备试剂和仪器
离心机、振荡器、匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒,PBS缓冲液、离心管、吸头、一次性手套、细胞筛(100μm)
一、使用注意事项

1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
二、植物组织细胞核提取
1. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200mg 左右(200mg-500mg 均可)的新鲜植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入 1ml 提取液 A 用匀浆机充分匀浆。注:匀浆尽可能充分。
3. 在匀浆液中加入 1 ml 提取液 A,充分混匀,然后将匀浆液用100μm细胞筛过滤。
注:
●没有细胞筛过滤条件,也可将匀浆液稍微静置,吸取上清匀浆液,丢弃大的组织碎片、纤维等沉淀。
●有些含黏液较多的样品可能难以吸取,可以将 1ml 吸头尖稍微剪掉一点使用。
●匀浆液量较少不好过滤时,可以补加 PBS 缓冲液后过滤。
4. 将滤液在 100×g 条件下离心 3 分钟,弃沉淀,收集上清。
5. 将上清在 2000×g 条件下离心 10 分钟,弃上清,收集沉淀。
6. 在沉淀中加入 500μl 提取液 B,充分混匀。
7. 置振荡器振荡 15 分钟。
注:
●用振荡器/摇床的较低转速,保持液体有轻微晃动即可。
●没有低温振荡条件可以不振荡,在 2-8℃静置,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。

8. 在 1000×g 条件下离心 10 分钟。弃上清,收集沉淀。
9. 在沉淀中加入 200μl 冷的核保存液 C,混匀。
注:也可以不用试剂盒中的核保存液,根据下游实验需要用相应的其他缓冲液保存或者直接用于下游实验。
10. 即可得到细胞核。
11. 将上述细胞核样品于 2-8℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
注:存放后需要收集细胞核使用时,在 2000×g 离心 10 分钟收集沉淀即可。

注意事项

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

8. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

9. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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