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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称支原体检测试剂盒(PCR法)
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保存温度-20℃
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有效期1年
产品简介支原体污染会对细胞各个方面都造成不良影响，已经成为细胞培养中高度重视的问题，因此，定期进行支原体污染检测是十分必要的。本支原体检测试剂盒采用 PCR 方法，特异性的检测各种培养细胞生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）中支原体的污染。试剂盒使用的混合引物是针对支原体 16s rRNA 序列的保守区域设计的特异性引物，可直接使用细胞培养液作为PCR 模板，特异性扩增支原体 DNA。使用本产品一小时内即可完成检测，检测灵敏度高，可检测低至20 个拷贝的支原体。
产品组成试剂A：Mycoplasma PCR Mix（2×）.....1 mL
试剂B：Mycoplasma Primer Mix...........200 μL
试剂C：Positive Control..............................50 μL
试剂D：Mycoplasma Free Water...............1 mL
操作步骤（仅供参考）1. 样品准备：取适量待检细胞培养上清于洁净的 PCR 管中，利用 PCR 仪95℃热处理5 min后作为模板。血清样本可利用 Mycoplasma Free Water 稀释后，取适量样本于洁净的PCR 管中，利用PCR仪95℃热处理 5 min 后作为模板；
2. PCR 体系配制：每次实验需设置阴性对照（将 1 μL 待检样品换成等量的Mycoplasma Free Water）与阳性对照（在 1 μL 待检样品中加入 0.5 μL Positive Control 后一起作为Template），实验时戴一次性口罩与手套，谨慎操作，防止操作不当引入外源支原体污染；
| 组分 | 20ul 体系 |
| Template | 1 μL |
| Mycoplasma Primer Mix | 2 μL |
| Mycoplasma PCR Mix（2×） | 10 μL |
| Mycoplasma Free Water | 补至20 μL |
3. PCR 程序设置：
| 步骤 | 温度 | 持续时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 2 min | 1 |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30 |
| 退火 | 56℃ | 25 s | |
| 延伸 | 72℃ | 10 s | |
| 延伸数据采集 | 72℃ | 5 min | 1 |
4. 凝胶电泳：取 10 μL PCR 产物，使用 1%琼脂糖凝胶进行电泳检测；
5. 结果分析：每次实验通过与阴性对照、阳性对照检测结果比较确认样品支原体污染情况，阳性条带大小 500 bp 左右。如阴性对照检测结果中有条带很有可能是 PCR 体系中出现污染，建议重新实验确认结果。如有必要，也可对 PCR 产物进行常规测序，以确定具体的支原体种属。
注意事项1. 本试剂盒可以检测 M. orale，M. arginini，M. bovis，M. fermentans，M. gallisepticum，M. hominis，M. pirum，Ureaplasma spp，M. hyorhinis，M. pneumoniae，A. laidlawii 等至少11 种以上支原体污染。
2. 所有试剂在使用前于冰上彻底解冻、混匀，使用完毕后于-20℃保存。
3. 每次实验必须设置阴性对照、阳性对照，实验组建议设置样品模板梯度。
4. 操作时必须佩戴口罩，严格按照 PCR 操作标准，防止引入外源污染影响实验结果。
5. 为了确保细胞实验的可靠性及稳定性，建议定期进行支原体污染检测。
6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
