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基本信息-
中文名称胰蛋白酶-EDTA溶液(2.5%,含酚红)
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别名胰蛋白酶-EDTA溶液(2.5%:0.02%,含酚红),胰蛋白酶-EDTA消化液(2.5%,含酚红)
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保存温度-20℃
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有效期1年
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应用又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
产品简介在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA 等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
本品胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)含2.5%胰酶0.2% EDTA(5.3mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。通常室温消化 2 分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。胰蛋白酶-EDTA 消化液有含酚红和不含酚红 2 类产品,酚红具有 pH 指示作用。
操作步骤(仅供参考)1. 贴壁细胞的消化
a) 吸去培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液,盖过细胞即可,室温放置 1-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项1. 本产品为 10x母液,工作浓度建议使用 1x
2. 由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
3. 本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
4. 不宜 4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
6. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
7. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
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