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斑马鱼产品
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产品简介1.外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡(30-150nm)，在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能，在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子；然而其构造、效应物组成以及所参与的生物学通路目前尚不明晰。
2.外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒，而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。Followme自主开发的外泌体提取纯化试剂盒，组分经过优化处理，适用于细胞培养上清液中的外泌体提取，并搭配纯化过滤装置，可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒，可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。
产品组成| 组分 | 2T | 20T |
| ExosomeConcentration Solution* | 12mL | 120mL |
| ExosomePurification Filter* | 2Tubes | 20Tubes |
* Nuclease-free, Sterile
操作说明(仅供参考)自备材料
高速离心机，涡旋振荡器，50mL 离心管，1.5mL 离心管，1×PBS缓冲液(无菌)
样品预处理
1.取样：如果是冻存样品，从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻，将完全融化后的样品置于冰上，如果是新鲜样品，收集样品后置于冰上；
2.样品初始用量：单次提取时的样品量建议细胞培养上清液不低于20mL；
3.离心去细胞碎片：将样品转移至离心管中，于4℃以3,000 ×g（~5,200 rpm**）离心10min，去除样品中的细胞碎片（注：若沉淀较多，可3,000 ×g，10min离心多次至无明显沉淀，每次取离心上清液）；
**为约10cm有效离心半径的大离心机换算（≥15mL离心管），下同。
4.离心去杂质碎片：将离心上清液转移至新的离心管中，于4℃以10,000×g（~9,500 rpm**）离心 10min，去除样品中的杂质碎片；
5.上清液转移：去除杂质碎片的上清液转移到新离心管中。
提取外泌体
1.上清液预处理：在去除杂质的离心上清液中加入Exosome Concentration Solution（ECS 试剂），具体的加入剂量如下（其他剂量请根据表中的用量等比例换算）：
| 样品名称 | 样品剂量 | ECS剂量 |
| 细胞上清 | 20mL | 5mL |
2.溶液混合：加入ECS试剂后将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀1min，再放置于4℃静置8h以上（注：增加静置时间可提高外泌体得率，但不可超过 24 h）；
3.沉淀外泌体：取出装有混合液的离心管于4℃以 10,000×g（~9,500 rpm**）离心60min，弃上清，沉淀中富含外泌体颗粒（注：尽可能吸尽上清液）；
4.再次离心：将含有沉淀的离心管再次于4℃以10,000×g（~9,500 rpm**）离心2min，弃上清（注：尽可能吸尽上清液）；
5.外泌体重悬：取合适量的1×PBS均匀吹打离心沉淀物，待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5mL离心管中（建议每20mL细胞培养上清用200μL左右1×PBS重悬）；
6.收获外泌体颗粒：将含有重悬液的1.5mL离心管于4℃以12,000 ×g（~12,400 rpm*）离心2min，保留上清液，其中富含外泌体颗粒（注：若沉淀较多，可 12,000×g，2 min 离心多次至无明显沉淀，每次取上清液）。
*为约 7cm有效离心半径的小离心机换算（≤2 mL离心管），下同。
纯化外泌体
1.纯化外泌体：将收获的外泌体颗粒粗品转入Exosome Purification Filter（EPF 柱）上室中，于4℃以3,000×g（~6,200 rpm*）离心10min，离心后收集 EPF柱管底的液体，此液体即为纯化后的外泌体颗粒（注：EPF柱不可重复使用）；
2.外泌体的保存：纯化后的外泌体以合适体积进行分装冻存于-80℃低温冰箱中，以备后续实验使用。
储存与保存1.保存：室温
2.有效期：2年
注意事项1.我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
3.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
