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快速EDTA脱钙液(免疫组化专用)  Cite:36    分享

货号: F16848
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  • 用途:组织慢速脱钙,螯合脱钙剂,主要用于免疫组化、原位杂交、电镜、骨的酶组织化学染色等。相对于常规10%的EDTA脱钙液,其脱钙速度有显著的提高
规格:
500ml
单位:
单价:¥120.00
基本信息
产品简介
操作步骤(仅供参考)
注意事项
附录
基本信息
  • 产品名称
    快速EDTA脱钙液(免疫组化专用)
  • 保存温度
    室温
  • 有效期
    1年
产品简介

在病理实验中针对骨组织或一些含钙组织制作切片时,由于硬度较大不能直接制作切片,需要脱去钙质使组织变软,方可制成切片。常用脱钙试剂有 EDTA、有机酸、无机酸等,其中 EDTA 是一种较温和的螯合型脱钙剂,可与羟基磷灰石结晶的外层钙结合,形成可溶性的非离子化合物,同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解,pH 中性时可起螯合作用。
本品快速 EDTA 脱钙液(免疫组化专用)主要由 0.5M EDTA 二钠盐、磷酸盐、去离子水等配制而成,pH 值为 7.2±0.2,专门用于免疫组化的脱钙,也可用于常规组织的脱钙,但所需时间较长。相较于 EDTA 脱钙液(10%),本产品属于快速脱钙液;如与快速酸性脱钙液(8%)或 JYBL-Ⅰ脱钙液等强酸性脱钙液相比,则本产品属于慢速脱钙液。本产品的特点是对组织结构影响最小,可以较好保存组织的某些酶类,经 EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化、原位杂交等检测,该法脱钙速度缓慢,脱钙周期长,一般需要数周至数月,与脱钙组织大小有关。

操作步骤(仅供参考)

自备材料
PBS、蒸馏水、加热装置或微波炉、脱钙专用容器(玻璃)
操作步骤(仅供参考)
1. 骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。
2. 将组织置于足量的 4%多聚甲醛固定液中固定 24 h 以上,用蒸馏水洗清洗3 次,每次20min。
3. 组织转移至 15~20 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。脱钙期间每隔 2-3 天更换新鲜的脱钙液,直到组织变软,手触碰骨组织有弹性能轻易弯折时即判断为脱钙终点。如果想加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙;亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔 3~5min。
4. 用蒸馏水冲洗数次,常规脱水、包埋。

注意事项

1. EDTA 脱钙温和,速度缓慢,不同组织所需脱钙时间不同,脱钙期间密切观察组织情况,避免脱钙过度损伤组织影响后续实验。
2. 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可,大多数在14~60 天即可。
3. 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
4. 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。5、 脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
6. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。

7. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。

8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 

9. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

10. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。 

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。

附录

脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。

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