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EDTA脱钙液(15%)  Cite:11    分享

货号: F16287
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  • 用途:组织慢速脱钙,螯合脱钙剂,适用于HE染色、免疫组化、原位杂交、电镜、骨的酶组织化学染色等
规格:
500ml
单位:
单价:¥180.00
基本信息
产品简介
操作步骤(仅供参考)
注意事项
附录
基本信息
  • 产品简介
    EDTA脱钙液(15%)
  • 保存温度
    室温
  • 有效期
    1年
  • 应用
    组织慢速脱钙,螯合脱钙剂,适用于HE染色、免疫组化、原位杂交、电镜、骨的酶组织化学染色等
产品简介

在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片,这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行,然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片;用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙,EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色,但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
本品EDTA 脱钙液(15%)主要由 EDTA 二钠盐、磷酸盐等组成,pH 值为7.2;其优点是:①经 EDTA 脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小;③适用于免疫组化和原位杂交染色;其缺点是:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬;③不宜用化学方法确定脱钙终点。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

操作步骤(仅供参考)

自备材料
1. PBS、蒸馏水
2. 加热装置或微波炉、脱钙专用容器(玻璃)
操作步骤(仅供参考)
1. 骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。
2. 组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3. 组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。
4. 组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙;如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次直至终点;亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔 3~5min。
5. 用蒸馏水冲洗数次。
6. 常规脱水、包埋。

注意事项

1. 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可,大多数在14~60 天即可。
2. 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于 60℃。
3. 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4. 脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6. 每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。

7. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。

8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 

9. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

10. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。 

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。

附录

脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。

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