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基本信息-
产品名称Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒
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保存温度-20℃ 避光
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有效期1年
产品简介本品Annexin V-PE 细胞凋亡检测试剂盒采用藻红蛋白（Phycoerythrin, PE）标记的重组人 Annexin V 来检测细胞凋亡。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine, PS）位于细胞膜内侧；细胞凋亡早期，PS 会外翻到细胞膜外侧。Annexin V（膜联蛋白 V）是一种 Ca 依赖性磷脂结合蛋白，可与 PS特异性结合，因此 Annexin V 常作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。Annexin V 经 PE 标记后可发红色荧光，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。经 Annexin V-PE 染色后，正常细胞基本无荧光，凋亡细胞及坏死细胞呈红色荧光。
产品组成| 组分 | 20T | 50T |
| Annexin V-PE | 100ul | 250ul |
| Binding Buffer | 12ml | 30ml |
操作步骤（仅供参考）1. 收集细胞：收集 1-5×105个细胞。悬浮细胞：1000 g 离心 5 min，弃去上清。加入 1 mL 预冷的 PBS 轻轻重悬细胞沉淀，1000 g 离心 5 min，弃去上清，保留细胞沉淀。贴壁细胞：小心吸取细胞培养液保存备用。加入 PBS 洗涤后，加入适量胰酶消化液（尽量不含 EDTA，以免影响 Annexin V 和 PS 的结合）消化细胞。加入前面收集的培养液，轻轻吹打细胞，制成单细胞悬液，1000 g 离心 5 min，弃去上清。加入 1 mL 预冷的 PBS 轻轻重悬细胞沉淀，1000 g 离心 5 min，弃去上清，保留细胞沉淀。
2. 加入 195 μL Binding Buffer，轻轻重悬细胞。
3. 加入 5 μL Annexin V-PE，轻轻混匀。
注：可根据实际情况调整 Annexin V-PE 的使用量。
4. 室温下避光孵育 10-20 min。
注：孵育过程中可轻轻颠倒数次以加强染色效果。
5. 检测与分析流式细胞仪检测：用流式细胞仪检测荧光强度。
注：PE 可以被 495 nm、545 nm 或 564 nm 的激发光激发，发出峰值为 575nm 的荧光。荧光显微镜检测：1000 g 离心 5 min，弃去上清，加入 50-100 μL BindingBuffer 轻轻重悬细胞沉淀，涂片后用荧光显微镜检测荧光强度。
图1.Phycoerythrin的荧光光谱
注：实线为激发光光谱，虚线为发射光光谱
注意事项1. 荧光染料都存在淬灭的问题，染色后应尽快检测荧光强度，且整个实验过程尽量避光下进行。
2. 若使用胰酶处理贴壁细胞，应尽可能地去除胰酶，防止 Annexin V-PE 降解从而导致染色失败。
3. Annexin V-PE 对人体有害，操作时务必小心。
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
