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产品简介产品内容
产品特点操作简单快速
最快1min即可得到变性总蛋白
无蛋白丢失
可打开DNA双链，高效获取与DNA结合的蛋白
小样本量、高得率
最小可处理20μL样本与裂解液混合物，提取的蛋白溶液浓度可达2~8mg/mL
适用多种实验
含有两种裂解液，既可用于提取变性蛋白质，也可提取天然蛋白质
使用说明◆提取变性总蛋白
1. 将纯化柱及收集管放在冰上预冷；
2. 样品处理(取适当量的变性裂解液，在使用前数分钟将蛋白酶抑制剂混合液 按1:100加入其中；PC201plus已包含蛋白酶抑制剂混合液，PC201则需额外购买<货号：grf101>。)
2a. 贴壁细胞：将预冷的1×PBS(货号：PS110)直接加入培养板、培养皿或培养瓶中清洗贴壁细胞，吸去上清。按照附表(文末)中将相应体积的变性裂解液均匀地加入整个器皿表面，用移液器吹打几次；
2b. 悬浮细胞：低速离心收集细胞，在1.5 mL离心管中加入预冷的1×PBS，涡旋震荡，3,000rpm离心2~3min清洗细胞。吸去多余上清，留下与细胞相同体积的PBS，涡旋震荡重悬细胞。加入附表中相应体积的变性裂解液，涡旋震荡裂解细胞；
注意：
①部分未完全裂解的细胞不会影响后续蛋白提取效果；
②加入裂解液后，如果细胞裂解物太过粘稠，无法用200~1,000μL吸头吹打，可将细胞裂解物直接倒入纯化柱中，进行后续操作。
2c. 组织样本：将15~20mg组织放置于纯化柱上，用塑料研磨棒扭转研磨50~60次，加入200μL变性裂解液，继续研磨30~60次。如样本起始量较大或者较小，需按比例调整相应裂解液的用量；
注意：塑料研磨棒可以重复使用，请用蒸馏水彻底冲洗干净，并用纸巾擦干。
3. 离心
3a. 贴壁细胞或悬浮细胞：将裂解后的细胞转移到预冷的纯化柱套管中，14,000~16,000 rpm离心30 s取出；
3b. 组织样本：盖上纯化柱盖子室温孵育1~2 min，14,000~16,000 rpm离心1~2 min取出；
4. 立刻将收集管放置于冰上，弃去纯化柱，变性总蛋白提取完成。
◆提取天然总蛋白
1. 将天然裂解液、纯化柱及收集管放在冰上预冷；
2.样品处理(取适当量的天然裂解液，在使用前数分钟将蛋白酶抑制剂混合液按1:100加入其中；PC201plus已包含蛋白酶抑制剂混合液，PC201则需额外购买<货号：grf101>。)
2a. 贴壁细胞：将预冷的1×PBS(货号：PS110)直接加入培养板，培养皿或培养瓶中清洗贴壁细胞，吸去上清。按照附表中将相应体积的天然裂解液均匀地加入整个器皿表面，放置于冰上孵育3~5min，用移液器吹打几次；
2b. 悬浮细胞：低速离心收集细胞，在1.5mL离心管中加入预冷的1×PBS，涡旋震荡，3,000rpm离心2~3min清洗细胞。吸去多余上清，留下与细胞相同体积的PBS，涡旋震荡重悬细胞。加入附表中相应体积的天然裂解液，涡旋震荡裂解细胞15s。将离心管放置于冰上3~5min，然后涡旋震荡10s；
注意：
①部分未完全裂解的细胞不会影响后续蛋白提取效果；
②加入裂解液后，如果细胞裂解物太过粘稠，无法用200~1,000 μL吸头吹打，可将细胞裂解物直接倒入纯化柱中，进行后续操作。
2c. 组织样本：将15~20mg组织放置于纯化柱上，用塑料研磨棒扭转研磨50~60次，加入200μL天然裂解液，继续研磨30~60次。如样本起始量较大或者较小，需按比例调整相应裂解液的用量；
注意：塑料研磨棒可以重复使用，请用蒸馏水彻底冲洗干净，并用纸巾擦干。
3.离心
3a. 贴壁细胞或悬浮细胞：将裂解后的细胞转移到预冷的纯化柱套管中，14,000~16,000rpm离心30s取出；
3b. 组织样本：开盖冰上孵育5min，盖上纯化柱盖子，4℃，14,000~16,000rpm离心1~2min取出；
4.立刻将收集管放置于冰上，弃去纯化柱，变性总蛋白提取完成。
附表 细胞数量与所需裂解液体积之间的关系
储存与保存本产品常温运输 ( 蛋白酶抑制剂混合液需冰袋运输 )；变性裂解液及天然裂解液储存于 4℃，蛋白酶抑制剂混合液 储存于 -20℃，其它组分储存于常温。保质期 12 个月。
注意事项1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
联系电话：13564444959
地 址：伊事达生化试剂有限公司
