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蛋白快速银染试剂盒  Cite:13    分享
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货号： F14585
复制产品信息
  • 用途：用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白质的银染,有增敏步骤,可明显降低背景。亦可用于后续的质谱检测
规格:
20T
单位:
盒
单价:￥650.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 产品名称
    蛋白快速银染试剂盒
  • 保存温度
    室温 避光
  • 有效期
    6个月
  • 应用
    用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白质的银染,有增敏步骤,可明显降低背景。亦可用于后续的质谱检测
产品简介

蛋白快速银染试剂盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一种快速的可用于SDS-PAGE或非变性 PAGE 等蛋白银染染色的试剂盒，该试剂盒含有增敏步骤，可明显降低背景，其优点还在于：1、操作简单、快速；2、可用于 2D 凝胶的银染，并可进行后续的质谱检测；3、目的条带清晰；4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit 与 Protein Silver StainKit 相比，前者操作速度更快，但检测灵敏度(0.5~10ng 蛋白/条带)可能略低于后者，尤其是在检测小分子量蛋白质的时候。

产品组成
组分20T保存温度
试剂(A): Silver Stain Sensitizer(500×)2×1ml室温
试剂(B): Silver Stain(100×)10ml室温 避光
试剂(C): Silver Stain Developer(5×)2×100ml室温
试剂(D): Silver Stain Stop Buffer(10×)100ml室温


操作步骤（仅供参考）

自备材料
1. 水平摇床或侧摆摇床
2. 去离子水(超纯)、乙醇、冰乙酸
操作步骤(仅供参考)
1. 准备工作：以下操作以 8.5×5.5cm、厚度为 1.0mm 的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，一般用量是 25ml，对于凝胶体积较大的，各溶液的使用量需按凝胶体积比例放大。整个银染过程应在摇床上进行，摇床转速控制在 60～70rpm，提前配制固定液，即按无水乙醇：冰乙酸：去离子水=5：1：4 的比例配制；提前配制洗涤液，即按无水乙醇：去离子水=1：4 的比例配制。
2. 水洗：电泳结束后，取凝胶放入去离子水中清洗 2 次，每次 5min。
3. 固定：取凝胶放入 50～100ml 固定液中，在摇床上室温摇动 15～20min，重复固定步骤 1 次。
4. 洗脱：取凝胶放入洗涤液中清洗 2 次，每次 5min。
5. 水洗：去离子水清洗凝胶 2 次，每次 5min。

6. 增敏：配制银染增敏工作液，即取 Silver Stain Sensitizer(500×)0.1ml 加入到50ml去离子水中，混匀，即为 1×Silver Stain Sensitizer，一般应 2h 内用完；室温下用1×Silver Stain Sensitizer 孵育凝胶 2min，立即用去离子水清洗凝胶2 次，每次1min。
7. 银染：配制银染工作液，即取 Silver Stain(100×)0.5ml 加入到 50ml 去离子水中，混匀，即得 1×Silver Stain，一般应 2h 内用完；取凝胶入 1×Silver Stain，在摇床上室温摇动10～20min。
8. 水洗：弃液，在摇床上用去离子水清洗凝胶 2 次，每次 30s，摇动速度在60～70rpm，总的水洗时间应控制在 1.5min 内。
9. 显影：配制银染显影工作液，即取 Silver Stain Developer(5×)10ml 加入到40ml 去离子水中，混匀，即为 1×Silver Stain Developer，一般应 30min 内用完，清洗凝胶后立即置于 1×Silver Stain Developer 中，室温孵育 2～10min，直至蛋白条带清晰可见；一般显色 30s 后就会出现棕色沉淀，继续显影 2～3min，亦可延长至5min 以上，如果显影效果不佳，可重新更换 1×Silver Stain Developer 继续显影。
10. 终止：配制银染终止液，即取 Silver Stain Stop Buffer(10×)10ml 加入到90ml 去离子水中，混匀，即为 1×Silver Stain Stop Buffer，迅速用去离子水清洗凝胶以避免显影过度，背景染色，立即加入银染终止液，摇床上摇动 10min，以终止显色反应。
11. 保存：弃终止液，加入去离子水 50ml，摇床上摇动 2～5min，弃液，短期保存于新鲜去离子水，长期保存可以制备干胶。

注意事项

1. 背景过深：①显色时间过长；②洗涤不充分；③凝胶中残留物质未去除干净；④去离子水的纯度过低。
2. 蛋白条带较浅：①蛋白的半胱氨酸含量过低；②银染后水洗时间过长；③蛋白量较低；④固定后的洗涤时间不够，导致乙酸残留。
3. 凝胶上出现杂质或非蛋白的印迹：①凝胶没有被充分浸没，应加入足量溶液；②容器没有清洗干净；③凝胶接触金属物质；④指纹或其他压迹。
4. 试剂(D)呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

5. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

7. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

8. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

 

备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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