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斑马鱼产品
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同类产品满五赠一
基本信息-
中文名称罗丹明标记鬼笔环肽
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英文名称TRITC Phalloidin
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CAS915013-10-4
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分子式C60H70N12O13S2
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分子量1231.4
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最大激发/发射波长(Ex/Em)540~546/565~575nm
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多肽序列(Sequence)TRITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Tr p-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6)
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性状紫色液体
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保存温度-20℃ 避光
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有效期1年
产品简介1. 鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏（Amanitaphalloides）的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd=20nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin，而不会与单体肌动蛋白G-actin结合，
通常用来标记组织切片，细胞培养物或无细胞体系中的F-actin，从而对F-actin进行定性和定量分析。
另外鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维，无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞，按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略，
染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。
2. 鬼笔环肽及其衍生物在纳摩尔浓度即可对F-actin染色，是非常实用和方便的探针，通常用于组织切片或细胞培养物中F-actin的特异性荧光染色。另外鬼笔环肽衍生物很小，直径约12-15Å，
分子量＜2000Daltons，经标记后的F-actin仍维持许多标记前的功能。比如同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNaseI等仍能发生反应；鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质；以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
3. 鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离，稳定微丝结构，从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至＜1µg/mL，因此可用作一种聚合促进剂。此外鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
4. 本品为TRITC(四甲基异硫氰酸罗丹明)标记的鬼笔环肽，染色反应特异性强，对比性高，具有比Actin抗体更好的染色效果，适合用作F-actin的定性和定量检测。另外经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。
5. 本产品以溶于甲醇 20uM 储存液形式提供，推荐工作浓度为 80~200 nM。本产品总体积300uL，按照100nM 的工作液浓度换算，可以制备总量 60mL 染色工作液，单次用量为 200 μL 染色工作液时，可以用于 300 个样品的检测。
操作步骤（仅供参考）1．工作液的配置：使用 1×PBS 缓冲液（含 1%BSA）稀释储存液到需要的工作浓度即可。
2．细胞爬片生长>24h，使其密度达到 50~60%汇合度。
3．吸掉培养液，37℃预热的 1×PBS 清洗 2 次。
4．使用 4%多聚甲醛溶液进行细胞固定，室温固定 10~30min。
注：避免固定剂中含有甲醇成分，因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
5．室温条件下，用 PBS 清洗细胞 2~3 次，每次 10min。
6．室温条件下，用丙酮（≤-20℃）脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理5min。
7．室温条件下，用 PBS 清洗细胞 2~3 次，每次 10min。
8．取 200 µL 配制好的 TRITC 标记鬼笔环肽工作液，覆盖住爬片上的细胞，室温避光孵育30min。
9．用 PBS 清洗细胞 3 次，每次 5min。
10．使用 DAPI 溶液对细胞核进行复染，约 30s。PBS 清洗细胞。
11．使用抗荧光淬灭封片剂进行封片。4℃避光保存，通常 6 个月内可继续做F-actin 染色分析。
注：也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 10 和 11。
12．荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，选择 TRITC 激发/发射滤片（Ex/Em=545/570nm）和 DAPI 激发/发射滤片（Ex/Em=364/454nm）。
注意事项1. 建议对本产品分装并于-20℃避光保存，避免反复冻融。
2. 不同的细胞染色情况不同，相应标记鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。
3. 鬼笔环肽具有毒性，需小心操作。
4. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
5. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
6. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准
