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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒
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存储条件干冰运输；-80℃避光保存，12 个月有效；-20℃避光保存，6 个月有效
产品简介萤火虫-荧光素酶体系多用于报告基因检测。将目的基因的转录调控元件克隆到luciferase的上下游，构建成报告基因（reporter gene）质粒。然后将质粒转染导入细胞，用药物或者其他刺激物处理转染的细胞后，收集细胞并裂解，测定裂解液中的荧光素酶活性。通过荧光素酶活性判断药物等外源刺激对目的基因的转录调控作用。
本产品萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒灵敏度高，检测范围广且荧光信号稳定。利用萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)，在Mg2+、ATP、O2等条件下，催化萤火虫荧光素底物(luciferin)氧化生成oxyluciferin，并在此过程中产生生物荧光的原理，可快速检测萤火虫荧光素酶活性。
产品组成| 组分 | 100T |
| Cell Lysis Buffer | 50 mL |
| Luciferase Reaction Substrate (50×) | 200 μL |
| Luciferase Reaction Buffer | 10 mL |
| 发光板(白色 可拆 配 8 孔条) | 2 片 |
操作步骤（仅供参考）1. 配制 1×萤火虫荧光素酶反应工作液：
1.1. 试剂盒各组分取出于室温解冻融化，颠倒混匀，确保各组分完全溶解。其中Luciferase ReactionSubstrate (50×)需置于冰上融化，离心机短时离心，确保试剂沉至管底；
1.2. 将Luciferase Reaction Substrate (50×)用Luciferase Reaction Buffer稀释 50 倍，即10 μL LuciferaseReaction Substrate (50×)+490 μL Luciferase Reaction Buffer混匀，得到 500 μL 1×萤火虫荧光素酶反应工作液备用。注意按照用量配制，避免浪费。1×萤火虫荧光素酶反应工作液建议现配现用，置于-20℃保存需在一个月内使用，避免反复冻融。
2. 细胞前处理以及裂解：
2.1. 细胞提前种植于相应孔板中，并根据实验需要，对细胞进行转染或其他相关前处理；
2.2. 对于贴壁细胞：去除原有细胞培养基后，参考下表加入对应量的细胞裂解液，使其覆盖细胞；对于悬浮细胞，转移细胞到离心管中，离心去除培养基后，参考下表加入对应量的细胞裂解液重悬细胞；
| 细胞培养板 | 细胞裂解液/孔 |
| 6-wel | 500 μL |
| 12-wel | 300 μL |
| 24-wel | 200 μL |
| 48-wel | 150 μL |
| 96-well | 100 μL |
2.3. 室温充分裂解 10-20 min后，刮取细胞收集于 1.5 mL离心管中，4℃，12000 g离心10 min，留取上清（细胞裂解物）备用；
3. 萤火虫荧光素酶检测：
3.1. 将提前配制好的 1×萤火虫荧光素酶反应工作液平衡至室温，以 100 μL/孔，加入到不透光的白色 96 孔板中；
3.2. 第 2 步的细胞裂解上清，以 20 μL/孔加到上述 96 孔板中；
3.3. 水平震荡均匀，立即用Luminometer发光计、带化学发光检测模块的多功能酶标仪或其它能够检测生物发光的仪器，进行化学发光检测。
注意事项1. 检测前，需要将提前配制的 1×萤火虫荧光素酶反应工作液恢复至室温再使用。
2. Luciferase Reaction Buffer解冻后有部分沉淀析出，属于正常现象，使用前充分震荡以确保其完全溶解。
3. 1×荧光素酶反应工作液易发生氧化反应，进行多样品检测时，1×萤火虫荧光素酶反应工作液添加应尽量控制在短时间内，建议使用排枪进行加样，并注意排枪各孔的吸液量是否一致。
4. 为了防止孔间干扰，推荐使用不透光白色孔板。亦可使用不透光黑色孔板，但是黑色会吸收荧光信号，降低检测的荧光信号。
5. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
7. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
8. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
