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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(分光光度法)
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保存温度按试剂盒各组分温度保存
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有效期6个月
产品简介正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：LDH（EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着 NAD+/NADH 之间互变。
测定原理：LDH 催化 NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与 2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
产品组成| 组分 | 50T/24S | 保存温度 |
| 提取液 | 30ml | 2-8℃ |
| 试剂一：液体 | 15ml | 2-8℃ |
| 试剂二：粉剂 | 1支 | -20℃ |
| 试剂三：液体 | 15ml | 2-8℃ |
| 试剂四：液剂 | 50ml | 2-8℃ |
| 试剂五：液体 | 100ul | 2-8℃ |
试剂二：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 10μl 试剂五和 1.3 ml 蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融；
操作步骤（仅供参考）自备仪器和用品
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 ml 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品测定的准备
1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为 1000~5000：1 的比例（建议 2000 万细菌或细胞加入 1ml 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1ml 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 450nm，蒸馏水调零。
2、 样本测定（在 EP 管中加入下列试剂）
| 试剂名称(μl) | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 50 | 50 |
| 试剂一 | 250 | 250 |
| 试剂二 | 50 | |
| 蒸馏水 | 50 | |
| 充分混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 15min | ||
| 试剂三 | 250 | 250 |
| 充分混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 15min | ||
| 试剂四 | 750 | 750 |
充分混匀，室温静置 15 分钟，450 nm 下测定吸光度，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需要设一个对照管。
LDH 活力单位的计算
1、标准条件下测定的回归曲线， y = 0.9108x+0.0037 (x 为标准品浓度，umol/ml；y 为ΔA)。
2、血清（浆）LDH 活力的计算
单位的定义：每 ml 血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
LDH（nmol/min/ml）=（ΔA-0.0037）÷0.9108÷T×103=73.2×ΔA
3、细胞、细菌和组织中 LDH 活力的计算
（1）按样本蛋白浓度计算：单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
LDH（nmol/min/mg prot）=[（ΔA-0.0037）÷0.9108×V1]÷(V1×Cpr)÷T×103 =73.2×ΔA÷Cpr 需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
（2） 按样本鲜重计算：单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
LDH（nmol/min/g 鲜重）=[（ΔA-0.0037）÷0.9108×V1]÷(W×V1÷V2)÷T×103 =73.2×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。
LDH（nmol/min/104 cell）= [（ΔA-0.0037）÷0.9108×V1]÷(2000×V1÷V2)÷T×103 =0.037×ΔA
V1：加入反应体系中样本体积，0.05ml；V2：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，15 min；Cpr：蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；2000：细胞或细菌总数，2000 万。
1、 标准曲线线性范围为：0.1 umol/ml -2 umol/ml。
2、ΔA 线性范围为：0.01 -2。
注意事项1. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
3. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
4. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
