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丙二醛(MDA)检测试剂盒(微量法)  Cite:79    分享
Malondialdehyde Content Assay Kit (Microassay)

货号： FS0307
复制产品信息
规格:
50T/48S 100T/96S
单位:
盒
单价:￥253.00
基本信息
产品简介
产品组成
操作步骤（仅供参考）
注意事项
基本信息
  • 中文名称
    丙二醛(MDA)检测试剂盒(微量法)
  • 检测方法
    微量法
  • 保存温度
    按产品各组分温度进行保存
  • 有效期
    6个月
产品简介

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理：MDA 与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在 532nm 有最大吸收峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定 600nm 下的吸光度，利用 532nm 与 600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的含量。

产品组成
组分50T/48S100T/96S保存温度
  提取液：液体50ml100ml室温 避光
  试剂一：液体10ml20ml室温 避光
  试剂二：粉剂1瓶1瓶 x 22-8℃

工作液配制：临用前取 1 瓶试剂二加入 10mL 试剂一，溶解混匀，4℃保存一周。工作液较难溶解，可以70℃-90℃加热，并剧烈振荡以促进溶解，或者通过超声处理以促进溶解。

操作步骤（仅供参考）

自备仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水
注意事项
临用前注意试剂一是否完全溶解，如未溶解，可以 70℃-90℃加热，并振荡以促进溶解。
MDA提取
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1ml 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）样品：按照血清（浆）：提取液体积(ml)为 1：1 的比例，充分混合。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤
1. 吸取 0.2ml 试剂一于 1.5ml 离心管中，再加入 0.2ml 样本, 混匀。
2. 95℃水浴中保温 30min（盖紧，防止水分散失），置于冰浴中冷却，10000g，25℃，离心 10min。
3. 吸取 200μl 上清液于微量石英比色皿或 96 孔板中，测定 532nm 和 600nm 处的吸光度，记为A532 和A600，ΔA=A532-A600。
MDA含量计算
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1. 血清（浆）中 MDA 含量的计算：
MDA 含量(nmol/ ml)=2×[ ΔA÷(ε×d)]×V 反总÷V 样=25.8×ΔA
2. 细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
（1）按照蛋白浓度计算
MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA÷(ε×d)]×(V 反总÷V 样)÷Cpr=12.9× ΔA ÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样品质量计算
MDA 含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔA÷(ε×d)]×(V 反总÷V 样)×V 样总÷W=12.9 ×ΔA ÷W
  (3) 按照细菌或细胞密度计算
MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA÷(ε×d)]×(V 反总÷V 样)÷(500÷V 样总)=0.0258×ΔA
V 反总：反应体系总体积，0.4 ml；ε：丙二醛摩尔消光系数，155×10-3 L / μmol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.2 ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
1. 血清（浆）中 MDA 含量的计算
MDA 含量(nmol/ ml)=2×[ ΔA÷(ε×d)]×V 反总÷V 样=51.6×ΔA
2. 细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
（1）按照蛋白浓度计算
MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA÷(ε×d)]×(V 反总÷V 样)÷Cpr=25.8× ΔA ÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样品质量计算
MDA 含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔA÷(ε×d)]×(V 反总÷V 样)×V 样总÷W=25.8×ΔA ÷W
  (3) 按照细菌或细胞密度计算
MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA÷(ε×d)]×(V 反总÷V 样)÷(500÷V 样总)=0.0516×ΔA
V 反总：反应体系总体积，0.4 ml；ε：丙二醛摩尔消光系数，155×10-3 L / μmol /cm；d：比色皿光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.2 ml；V 样总：加入提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。

注意事项

1. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

3. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

4. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

 

备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。

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