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斑马鱼产品
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基本信息-
英文名称DAPI
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中文名称4',6-二脒基-2-苯基吲哚
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CAS28718-90-3
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分子式C16H15N5·2HCl
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分子量350.25
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纯度98%
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性状黄色粉末
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危险代码R:36/37/38 S:26-36
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保存温度-20℃ 避光
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有效期3年
产品简介DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。
本DAPI溶液用水配制,加热有助于溶解。
用于细胞核染色时,推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。
产品用途1. 用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测;
2. 检测酵母线粒体DNA,叶绿体DNA,病毒DNA,microplasm DNA 以及染色体DNA。
3. 用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
操作方法(仅供参考)配制母液
用双蒸水溶解,终浓度为1mg/ml。本产品不可以用缓冲液直接溶解。建议分装保存,避免反复冻融。
配制工作液
用双蒸水或 PBS 稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10μg/ml)。
1. 固定的细胞或组织染色
对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。
a. 对于贴壁细胞或组织切片:加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3倍的染色液,混匀。室温放置3~5分钟。
b. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2~3次,每次3~5分钟。
c. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。激发波长360nm,发射波长460nm。
2. 活细胞或组织染色
a. 细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于 96 孔板一个孔需加入100μl染色液。
b. 在37℃培养细胞10~20分钟。
c. 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm,发射波长460nm。
注意事项1. DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4. 该产品更推荐用于处理固定后细胞样本,如贴壁细胞需不固定染色,推荐使用Hoechst 33342
5. 请根据实际情况调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准





