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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称Hoechst33258染色液（1mg/ml,非无菌）
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保存温度-20℃ 避光
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有效期1年
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应用细胞凋亡检测、普通细胞核染色、常规的DNA染色
产品简介Hoechst 33258也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258，CAS号23491-45-4。Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也用于普通的细胞核染色、DNA 染色。
Hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm，Hoechst 33258和双链DNA结合后，最大激发波长为352nm， 最大发射波长为461nm。
Hoechst 33258染色液是浓缩的储存液，秲释后使用，一般推荐工作浓度为1～5μg/ml，用于固定细胞或组织的细胞核染色。
操作步骤（仅供参考）自备材料
1、 荧光显微镜、微量移液器
2、 蒸馏水、PBS 或生理盐水
一、固定的组织细胞染色
1. 根据实验具体要求，用无菌去离子水秲释到自己所需浓度，即为Hoechst 33258 染色工作液。细胞核染色时，一般推荐工作浓度为1～5μg/ml。
2. 于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积以上的Hoechst 33258染色液，充分混匀。
3. 室温放置5～8min。
4. 轻轻吸除Hoechst 33258染色液。
5. 用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3 次，每次 3～5min。
6. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。
二、活细胞染色
1. 根据实验具体要求，用无菌去离子水秲释到自己所需浓度，即为Hoechst 33258染色工作液。细胞核染色时，一般推荐工作浓度为1～5μg/ml。
2. 取96、24、6孔板培养细胞至合适状态，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入适当的Hoechst 33258染色液，染液必须充分覆盖细胞。
3. 在适宜于细胞培养的条件下培养20～30min。
4. 轻轻吸除Hoechst 33258染色液。
5. 用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。
6. 进行荧光检测。
注意事项1. Hoechst 33258 染色液(1mg/ml)应秲释至合适的浓度后使用。
2. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。活细胞或组织染色后宜立即观察。
3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4. 避免反复冻融，否则容易失效。
5. Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
