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吖啶橙染色液(1mg/ml)  Cite:27    分享
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货号: F13397
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  • 用途:流式细胞术检测细胞DNA含量,通过染色定量分析DNA,亦可通过荧光显微镜观察形态变化
规格:
10ML
单位:
单价:¥192.00
基本信息
产品简介
操作步骤(仅供参考)
染色结果
储存与保存
注意事项
基本信息
  • 中文名称
    吖啶橙染色液(1mg/ml)
  • 中文别名
    AO染色液(1mg/ml)
产品简介

吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链 DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。


吖啶橙染色液(1mg/ml)为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。染色后在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与EB染色合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

操作步骤(仅供参考)

自备材料
1. 荧光显微镜
2. 低速离心机
3. PBS
4. 细胞计数板
5. 载玻片、盖玻片

操作步骤 (仅供参考) 
1. 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用PBS清洗细胞1次,计数并调节细胞浓度至106/ml。
2. 取适量的细胞悬液,加入Acridine Orange Stain(1mg/ml),使AO终浓度为 8.5~17μg/ml,轻轻混匀。
3. 室温避光染色15~20min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。 
4. 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。

染色结果
正常细胞细胞被均匀染成黄绿色荧光
凋亡细胞染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒


储存与保存

1.保存:4℃,避光保存
2.有效期:6个月

注意事项

1.Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜剂,较少单独使用。
2.吖啶橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
3.如有低温离心机进行离心效果更佳。
4.操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
5.试剂有一定毒性,请小心操作。
6.我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。

7.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 

8.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

9.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。 

 

备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。

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