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基本信息-
产品名称MTT溶液(5mg/ml)
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保存温度-20℃ 避光
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有效期1年
产品简介MTT 比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT 检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色 Formazan 并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在特定溶剂 (如DMSO)存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定 570nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
操作步骤（仅供参考）1. 细胞用含血清的培养液培养至对数生长期，常规胰蛋白酶消化液消化细胞（悬浮细胞无需消化）。
2. 低速离心，收集细胞沉淀。
3. 用培养液重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬液，并计数。
4. 细胞接种于 96 孔培养板，一般接种密度为 3000-10000/孔。通常细胞增殖实验每孔加 3000 个细胞，细胞毒性实验每孔加 6000 个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定。
5. 37℃ 5% CO2继续培养或按照实验具体需要进行培养，一般培养 6-24h。
6. 按照实验具体要求，给予 0-20μL 干预药物处理，37℃ 5% CO2继续培养至合适时间。
7. 弃培养液，每孔加入 MTT 溶液和新鲜培养液，在细胞培养箱内继续孵育。
8. 弃培养液，每孔加入 DMSO，置摇床上低速震荡，使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多，溶解的时间会长一些。
9. 在酶标仪 570nm 测定各孔吸光度。若读数超出最大范围，可改用 OD490 测定各孔吸光值。
注意事项1. MTT 溶液尽量减少反复冻融的次数，以免失效，当颜色变为灰绿色时，请勿使用。
2. 由于使用 96 孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，应注意蒸发问题。
3. MTT 溶液在低温情况下会凝固，使用前请置于室温或 20-25℃水浴至全部融解后使用。
4. 观察 Formazan 是否完全溶解，亦可借助光学显微镜观察。
5. 培养细胞时尽量避免细菌污染。
6. 应注意设立 OD 调零孔和对照。
7. 含酚红的培养基和盐溶液会使背景的吸光值增高，同时也会降低灵敏度。
8. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
9. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
10. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
11. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
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