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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称Lipo2000 转染试剂
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中文别名脂质体2000
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英文名称Lipo2000 Transfection Reagent
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保存温度2-8℃ 切勿冷冻！
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有效期1年
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应用能有效转染较广泛的贴壁和悬浮细胞系
产品简介Summus®Lipo2000 转染试剂是一种新型的阳离子脂质体转染试剂，完全替代lifelipo2000，且与 Lipo2000比其毒性更低，转染效率更高。本产品适合于将核酸（DNA和RNA）转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
本产品适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。
操作步骤（仅供参考）举例：质粒DNA的转染
以下步骤以24孔板为例，对于其它培养板或培养器皿，各种试剂的用量可以参考附表1进行换算。
对大多数细胞来说，DNA(µg) 与转染试剂(µl) 的比例为1:2-1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。
一、接种细胞
贴壁细胞：转染前一天，用500µl不含抗生素的培养基接种0.5-2×105细胞，使之第二天汇合度能达到70-90%。
悬浮细胞：在准备DNA-转染试剂复合物之前，用500µl不含抗生素的培养基接种4-8×105细胞即可。
二、对每个转染样品，进行以下操作
1. 在1.5ml无菌离心管中分别加入50µl Opti-MEM I ReLipced SerumMedium和0.8µg DNA轻柔混匀，制成 DNA稀释液。
2. 在另一个1.5ml无菌离心管中分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced SerumMedium和2.0µl转染试剂（注意用前先混匀），轻柔混匀，制成转染试剂稀释液，室温静置5分钟。
3. 将DNA稀释液和转染试剂稀释液混合，轻柔混匀，室温静置20分钟，形成DNA- 转染试剂复合物。DNA-转染试剂复合物在室温下可稳定保存6小时。
三、将DNA-转染试剂复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。
四、在37℃，CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基继续培养。
五、转染后续处理
1. 对于基因表达，再培养18-48小时后即可检测转染效果，如转染带GFP或者其他荧光基因的表达载体，可用荧光显微镜观测细胞转染效率。
2. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10 或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。
注意事项1. 质粒DNA转染的优化：为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和转染试剂的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5-1:5的范围内优化DNA(µg)和 Lip2000 (µl) 的比例。
2. 通常 DNA-转染试剂复合物和细胞一起孵育6小时已经足够产生较高的转染效率。大多数细胞在本产品转染后长达72小时未见明显细胞毒性。但转染后6小时更换新鲜培养基对于一些生长非常迅速的细胞有助于提高转染效率；对于一些易于转染的细胞如HEK293T细胞，换液可视细胞生长状况而定，无需为提高转染效率而换液。
3. 使用高纯度的DNA（A260/280比值越接近1.8越好）有助于获得较高的转染效率。
4. 转染前细胞需处于良好的生长状态。
5. 本产品在不同细胞上的转染效率不同，转染试剂的添加量需要摸索，具体请参考附表2和附表3。
6. 本产品为无菌包装，无需过滤，请注意无菌取用。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
附表1附表1. 不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及转染试剂用量
附表2附表 2. 常见细胞的转染效率（仅供参考，实验条件不同转染效率会有差别）
附表3附表 3. Summus®Lip2000 转染试剂用于不同细胞转染时用量参考（以96孔板为例）
