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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称植物过氧化氢染色液(DAB,PH3.8)
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保存温度2-8℃ 避光
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有效期1年
基本信息植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS 活性非常大且极其不稳定,因此 ROS 的检测通常因其最终产物而定。过氧化氢是活性氧的一种。在过氧化氢酶的催化下,过氧化氢能与 DAB(3,3-二氨基联苯胺四盐酸盐)迅速反应生成棕红色化合物,从而定位组织中的过氧化氢。
本品植物过氧化氢染色液(DAB,pH3.8)根据上述基本原理也称为DAB 染色法,用于植物活组织中的过氧化氢染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后有过氧化氢聚集的部位呈棕色至深棕色。该产品仅用于科研领域,不用于临床诊断或其他用途。
产品组成| 组分 | 3x100ml | 保存温度 |
| 试剂(A):DAB | 100mg | 2-8℃ 避光 |
| 试剂(B):磷酸缓冲液(pH 3.8) | 100ml | RT |
| 试剂(C):DAB 样本保存液 | 2x100ml | RT |
操作步骤(仅供参考)自备材料
1. 新鲜的植物叶片或根、自来水、蒸馏水、95%乙醇
2. 超声波、磁力搅拌器、电子天平、滤纸、照相机
操作步骤(仅供参考)
1. 试剂准备:将 100 mg DAB 加入到 100 mL 磷酸缓冲液中充分溶解,即得DAB染色工作液,4℃避光保存,一周内有效;-20℃保存,可适当延长保质期。注:DAB 对光敏感,溶解过程需要避光,如果较难溶解,可通过超声、磁力搅拌等方法促溶。
2. 样本准备:采集经胁迫(例如重金属)的植物幼苗或根尖,自来水稍洗净,置于滤纸上吸干多余的水分。
3. 染色:将植物幼苗或根尖浸没在 DAB 染色工作染液中,常温避光染色2~6 h,至阳性部位出现深棕色,其余部位近无色或者呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度和显色程度调整染色时间)
4. 脱色:用镊子将植株幼苗或者叶片小心取出,浸入蒸馏水中来回漂洗3~5 次,置于滤纸上吸干多余水分后,浸入 95%乙醇中 40℃处理 3~16 h,目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素,脱色期间可多次更换新鲜的 95%乙醇。
5. 观察:用镊子取出植株幼苗或者叶片,浸入蒸馏水中来回漂洗 3~5 次,置于滤纸上吸干多余水分后,将样本转入适量 DAB 样本保存液中浸泡 30 min,随后可取出拍照。样本可置于该保存液中常温保存一周。
注意事项1. DAB 染色工作液配制好以后需 4℃避光保存,一周内使用。存放时间过久,会影响显色。
2. 因过氧化氢容易分解,且任何外在因素都可能刺激植物应激产生过氧化氢,因此植物样本需要新鲜采集,并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。
3. 样本染色完成后尽快拍照保存结果。
4. DAB 可能具致癌性,请小心操作,避免直接接触。
5. 染色和脱色步骤也可参考如下建议操作:组织放入染液中,抽真空,-0.1MPa 保持负压20~30min,再于室温下静置染色 60min,弃染色液;加入 95%乙醇,于70~80℃水浴锅脱色,每隔 10min 换一次 95%乙醇,待样品绿色全部褪去后可停止脱色。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
7. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
8. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。



