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- CAS：273221-67-3
- 分子式：C51H50F2N2O23
- 分子量：1096.94
- 纯度：≥90% （HPLC）
基本信息-
中文名称Fluo-4 AM 钙离子荧光探针
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英文名称Fluo-4 AM
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CAS273221-67-3
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分子式C51H50F2N2O23
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分子量1096.94
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外观橙红色粉末
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纯度≥90% （HPLC）
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保存温度-20℃(该产品在溶液状态不稳定，建议您现用现配，即刻使用)
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有效期1年
产品简介Fluo-4是一种将Fluo-3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F，它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长，所以用氩激光器激发时，Fluo-4的荧光强度比Fluo-3强一倍。 Fluo-4 AM穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4，从而被滞留在细胞内，Fluo-4若以游离配体形 式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，最大激发波长为494nm，最大发射波长为516nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
操作方法（仅供参考）以for Human T cells为例
一、试剂
2mM的 Fluo-4 AM/DMSO （将1mg Fluo-4 AM 溶于442µL DMSO ）
Pluronic F127
Hanks balanced salt solution（HBSS）：建议使用不含钙镁、不含酚红的HBSS
HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl， 1mM CaCl2， 0.5mM MgCl2，5mM Glucose，0.1% BSA，pH 7.4 ）
二、操作
1. 向Fluo-4 AM/DMSO 溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127可以防止Fluo-4 AM 在HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
2. 用HBSS稀释 Fluo-4 AM溶液，制备4µM的Fluo-4 AM工作液。
3. 将Fluo-4 AM 工作液加入细胞，在37℃培养20分钟。
4. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。
5. 用HEPES buffer saline 洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成 1×105cells/mL的溶液。
6. 37 ℃下培养10分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长494nm，发射波长516nm 。
注意：标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
注意事项1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
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