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斑马鱼产品
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- CAS：121714-22-5
- 分子式：C51H50Cl2N2O23
- 分子量：1129.9
- 纯度：≥90%(HPLC)
基本信息-
中文名称Fluo-3 AM 钙离子荧光探针
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英文名称Fluo-3 AM
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别名钙荧光探针 钙离子探针
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CAS121714-22-5
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分子式C51H50Cl2N2O23
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分子量1129.9
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性状红色粉末（本品为冻干粉形式，可能会粘附在管壁上，是正常现象，可放心使用）
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纯度≥90%(HPLC)
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保存温度-20℃ 避光
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有效期1年
产品简介Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内源性酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506 nm，最大发射波长为526nm。Fluo-3 AM的一个重要作用是其在高通量药物筛选中的应用。
操作步骤（仅供参考）1. 用DMSO溶解配制1-5mM的Fluo-3 AM母液，向Fluo-3 AM/DMSO溶液中加入等体积的20%的Pluronic F127溶液，Pluronic F127可以防止Fluo-3 AM 在HBSS中聚合并能够帮助其进入细胞。（注意：不建议在 Pluronic F127中长期保存 Fluo-3 AM溶液。Pluronic F127的量可以适当调整，Pluronic F127 和 Fluo-3 AM 一定要确保完全溶解后才可使用。）
2. 用HBSS溶液稀释1-5 mM的Fluo-3 AM母液，配制成1-5 μM的Fluo-3 AM工作液（此浓度仅供参考，请根据具体实验要求自行调整）。
3. 取出预培养细胞，去除培养基，用HBSS溶液洗涤细胞三次。
4. 加入Fluo-3 AM工作液，溶液量以覆盖细胞为准。
5. 37℃细胞培养箱孵育约10-60min。
6. 去除Fluo-3 AM工作液，用HEPES buffer saline溶液洗涤细胞三次。
7. 加入含1%胎牛血清的HBSS溶液，使其覆盖细胞，37℃细胞培养箱孵育约20-30min，确保AM体在细胞内的完全去酯化作用。
8. 用激光共聚焦或荧光显微镜检测细胞，激发波长480-500nm，发射波长525-530nm，如需荧光酶标仪或流式检测需用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1×105 cells/mL的溶液。
注意事项1. 如果使用含有血清的培养基，血清中的酯酶会分解AM体，从而降低Fluo-3 AM进入细胞的效果。另外，含有酚红的培养基会使本底值略微偏高，所以加工作液之前，应尽量去除培养基残留。
2. 关于细胞孵育时间，建议先孵育30min，看荧光效果。如果细胞死亡较多，应缩短时间；如果荧光强度太弱，适当延长时间。
3. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
5. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
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