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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称2,3,5氯化三苯基四氮唑 TTC
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英文名称TTC
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别名氯代三苯基四氮唑（TTC），红四氮唑，四氮唑红，红四唑，2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride
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CAS298-96-4
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分子式C19H15ClN4
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分子量334.81
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级别Reagent Grade
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纯度≥98.0%
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性状白色至浅黄色粉末
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溶解性0.4% 用 Pb 溶解，2% 用 Pb 溶解
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保存温度2-8℃
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有效期3年
产品简介2,3,5-氯化三苯基四氮唑，又称四唑红，简称TTC，TTZ，或 TPTZ，一种脂溶性光敏感复合物，即可用来检测种子的生存能力，也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂，活细胞内的脱氢酶（尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。对于种子或者植物组织来说，染色结果为活组织被染成不同程度的红色，死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织，因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色，而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为 2%（w/v）（货号：F12192），也可根据组织类型做浓度的适当调整。
操作步骤（仅供参考）染色工作液的配制（动物组织，仅供参考）
TTC通常用PB磷酸缓冲盐溶液来配制，pH范围为6.5-7.5之间，常用浓度为0.4%-2%，一般浓度不宜大于2%，具体浓度根据不同实验要求而定，配制好的TTC溶液要避光保存。
可使用以下的缓冲盐体系配制：
1. 取 9.078g KH2PO4（Mw:136.09）溶于1L去离子水内，制备成66.7mM KH2PO4储存液；取 10.9472gNa2HPO4·H2O（Mw:159.974）溶于1L去离子水内，制备成68.6mM Na2HPO4储存液；将两份KH2PO4储存液与1份Na2HPO4储存液充分混合，即得到需要的PB磷酸缓冲液溶液。
2. 根据需要的TTC工作液浓度来制备，如加入2g TTC粉末到100ml混合的PB磷酸盐缓冲液中，即得到2%的染色工作液。此时的溶液pH值在6.5-7.5之间。此工作液可装到不透明的白色瓶或者棕色瓶子内，4℃保存几个月稳定。
注意：TTC染色液的缓冲体系可根据自己的实验习惯来调整；也可用去离子水来溶解配置成10mg/ml的储存液，过滤除菌，建议此法染色液当天使用。
一、动物组织染色（以小鼠脑组织染色为例）
1. 麻醉小鼠，取小鼠脑组织，用生理盐水洗净，-20℃冷冻20min左右。
2. 切片：一般切成5－6片，每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。
3. 将切好的小鼠脑片放入TTC溶液。
4. 37℃避光孵育15-30min，孵育过程中可每隔10min小心的翻动脑片，边孵育边观察颜色变化。注意：TTC染色液可重复使用2-3次，可将用过的TTC染色液放到新的容器内继续使用。
5. （可选）轻柔的吸取缓冲液（如1×PBS）将组织表面多余的染色液冲洗掉。
6. 此时即可观察或者拍照。若需长久保存，用 4%多聚甲醛溶液（货号：S51102）固定10-20min。
结果判断：正常组织被染成红色，梗死区呈灰白色。
二、植物样本染色
1. 将待测种子用温水（30-35℃）浸泡2～6h，使种子充分吸胀。
2. 随机取种子100粒，沿种胚中心线纵切为两半，将每粒种子的一半分别置于两个培养皿中，备用。
3. （可选）可将其中一半种子置于沸水中煮沸5min，杀死细胞，作为阴性对照。
4. 向含有种子的培养皿中加入TTC溶液，以浸没种子为度。
5. 放入30-35℃的恒温箱内保温30min-1h。
6. 倒出TTC染色液，用自来水冲洗2～3 次，立即观察种子着染色情况。
结果判断：有活力的种子被染成红色，阴性对照和无活力种子不被染色。
注意事项1. 本品具有微量的光和热敏感性，使用以及存放的过程中避免长时间曝光或者接触到过高温度下。
2. 本品不适合用PBS溶解。
3. 脑组织切片时间尽可能的短，时间过长会影响脑组织表面脱氢酶的活性从而影响染色效果。
4. TTC使用浓度根据具体实验要求而定。
5. TTC染液可反复染色2～3次，若溶液变红色则不可再用。
6. 染色时要使组织切片全部浸入TTC染色液中。翻动脑片时一定要小心，以免破坏脑片形态。
7. TCC染色后应立即观察，不可久放。 若需长久保存，可用4%多聚甲醛固定。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
9. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
10. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。
