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AH109-GAL4系统酵母双杂互作验证试剂盒  Cite:0    分享
AH109-GAL4 Yeast Two-Hybrid interaction proving kit

货号： SQ1109
复制产品信息
规格:
10T
单位:
盒
单价:￥4318.00
产品简介
产品组成
储存与保存
注意事项
产品简介

 酵母双杂的原理基础：很多真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分割开的结构域，即DNA特异结合域（DNA-binding domain,BD）与转录激活域（Transcriptional activationdomain，AD）。这两个结构域各具功能，互不影响。但一个完整的激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域，否则无法完成激活功能。不同来源激活因子的BD区与AD结合后则特异地激活被BD结合的基因表达。基于这个原理，可将两个待测蛋白分别与这两个结构域建成融合蛋白，并共表达于同一个酵母细胞内。如果两个待测蛋白间能发生相互作用，就会通过待测蛋白的桥梁作用使AD与BD形成一个完整的转录激活因子并激活相应的报告基因表达。通过对报告基因表型的测定可以很容易地知道待测蛋白系统。分子间是否发生了相互作用。

酵母双杂交系统由三个部分组成：（1）与BD融合的蛋白表达载体，被表达的蛋白称诱饵蛋白（bait）。（2）与AD融合的蛋白表达载体，被其表达的蛋白称靶蛋白（prey）。（3）带有一个或多个报告基因的宿主菌株。常用的报告基因有HIS3，URA3，LacZ和 ADE2等。而菌株则具有相应的缺陷型。双杂交质粒上分别带有不同的抗性基因和营养标记基因。这些有利于实验后期杂交质粒的鉴定与分离。根据目前通用的系统中BD来源的不同主要分为GAL4系统和LexA，目前常用的是Y2HGold-GAL4和AH109-GAL4系统。

 AH109是GAL4系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker为：trp1，leu2，报告基因为：lacZ，HIS3，ADE2，MEL1。AH109-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：pGBKT7和pGADT7。质粒pGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD（来自酵母转录因子GAL4N端1~174位氨基酸）与目标蛋白（Bait）的融合蛋白；质粒pGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD（GAL4 C端768~881位氨基酸）与目标蛋白（Prey）的融合蛋白。

产品组成

产品组成产品组分规格(10T)
成分一培养基SD/-Leu/-Trp Broth 0.5L×1
SD/-Leu/-Trp with Agar0.5L×3
SD/-His/-Leu/-Trp with Agar（备用）0.5L×1
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp with Agar0.5L×3
筛选剂X-α-gal 溶液 （20 mg/mL，过滤除菌） 5×1mL
3-AT（2.5 M，过滤除菌） 25mL
质粒pGADT7 质粒 10μg
pGBKT7 质粒 10μg
对照菌株AH109[pGBKT7-53+pGADT7-T]冻干粉 0.2mL

AH109[pGBKT7-Lam+pGADT7-T]冻干粉0.2mL
成份二 感受态细胞AH109 感受态细胞20×100μL/支


储存与保存

成分一蓝冰运输，成分二干冰运输；
各组分按照标签所示温度进行储存，成分一保质期 18 个月，成分二保质期 6 个月。

注意事项

1.我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。

2.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 

3.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

4.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。 

 

备注：由于产品信息可能会有优化升级，请以实际收货标签信息为准。

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