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基本信息-
中文名称SYTO 9绿色荧光核酸染料(粉末)
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英文名称SYTO9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain
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分子量305.42
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性状橙色固体
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纯度>98%
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DMSO中溶解性＞1.527mg/ml（5mM）
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澄清度DMSO中澄清，无杂质
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激发及发射485/498nm（与DNA结合）；486/501nm（与RNA结合）
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纯度BR>98%
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保存温度-20℃ 避光 干燥
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有效期1年
产品简介SYTO9是一种可以与核酸结合并发出明亮绿色荧光的细胞渗透性荧光染料。SYTO9应用广泛，可以用来染色活细胞、死细胞及细菌中的RNA和DNA。另外也可以用于RT-PCR、DNA溶解曲线分析及环介导等温扩增（LAMP）实验，其PCR抑制率低、信噪比高、灵敏度高，是SYBR Green Ⅰ的理想替代染料。我司SYTO 9绿色荧光核酸染料以高纯度粉末形式提供，可以根据使用浓度配置使用，操作灵活，用途广泛。
产品用途1．细胞染色：SYTO9具有细胞膜渗透性，能够很好地渗透进入原核和真核细胞膜，广泛与细胞核、细胞质及线粒体内的DNA和RNA结合发出明亮的绿色荧光。
2．细菌活死染色：SYTO 9常与碘化丙啶（PI）联合使用，用于区分活细菌和死细菌，评估细菌的存活率或药物对细菌的影响。
3．RT-PCR、DNA熔解曲线分析及环介导恒温扩增技术（LAMP）：SYTO9作为一款灵敏的DNA结合染料，可以替代SYBR Green Ⅰ用于RT-PCR等扩增实验中。
操作步骤（仅供参考）1. 细胞染色
(1) 储存液配置：以1mg产品为例，加入654.836ul DMSO，充分溶解，制备成5mM母液。溶解后的母液建议分装，避光储存于-20℃，可稳定保存1年。
(2) 根据实验样本类型，参考下表内建议的工作液浓度稀释染料。注意：初次实验，请在建议浓度范围内多设置不同的梯度浓度，以确定能得到最佳染色效果的工作液浓度。悬浮细胞，离心收集细胞，用生理盐溶液重悬细胞。贴壁细胞（比如：哺乳动物细胞）可以在盖玻片上原位染色。
(3) 根据下表提供的孵育条件进行孵育染色。注意：生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞和其它因素都可能影响染色。染色条件需要根据不同细胞类型和实验进行调整。
(4) 使用荧光显微镜观察染色结果。染色的真核细胞通常显示出弥散的细胞浆染色、细胞核染色及明亮的核内小体染色。由于此染料具细胞膜渗透性，且中性pH下带净正电荷，也有可能染线粒体。活酵母菌内主要为线粒体染色。
| 表1. SYTO9染色不同细胞的建议工作浓度和孵育条件 | ||
| 细胞类型 | SYTO9浓度 | 孵育条件 |
| 细菌 | 50nM-20µM | 涡旋混匀，孵育1-30 min |
| 真核细胞 | 10nM-5µM | 孵育10-120 min |
| 微阵列 | 50nM in TE buffer | 孵育5 min，清洗之后晾干 |
2. 活死细菌染色
(1) SYTO9染料配置：以1mg产品为例，加入654.836ulDMSO，充分溶解，制备成5mM母液。
(2) 用棕色离心管稀释SYTO9和PI（我司货号：MA0137/MB2920），使其浓度分别为33.4µM和400µM。
(3) 向0.9mL收集的细菌培养物中加入SYTO9和PI工作液各50uL，使其最终浓度分别为1.67µM和20µM。
(4) 避光孵育15分钟。
(5) 使用荧光显微镜观察或者流式细胞仪进行检测。
3. RT-PCR和DNA熔解曲线分析
以1mg产品为例，加入1.6371mLDMSO，完全溶解，即为配置1000x SYTO9染料溶液（2mM）。在扩增体系中加入终浓度2µM的SYTO9染料，与体系混合均匀后，进行RT-PCR程序，使用FAM通道进行结果分析。
4. 环介导恒温扩增技术（LAMP）
在扩增体系中加入终浓度为0.5μM至10μM的SYTO9染料，与体系混合均匀后，至于扩增仪中，扩增条件设置为65℃ 60min，然后升温至90℃ 10min终止反应。real-time LAMP反应完成后，通过凝胶电泳确认LAMP扩增产物。
注意事项1. 建议使用塑料管稀释SYTO9染色剂，稀释后的染色剂会粘附在玻璃上，因此建议避免使用玻璃器皿。
2. 建议使用不含磷酸盐的缓冲液，可以得到更好的染色效果。
3. 塑料或玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响染色效果，导致在含或者不含细胞的溶液中都能看到明亮荧光的材料。建议用温和的清洁剂清洗所有实验室器皿，用热自来水完全冲洗干净，最后用去离子水冲洗数次。
4. 荧光探针均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
5. 我司生产的生化试剂如无特殊标注，基本为非无菌包装，若用于细胞实验，请提前做好预处理。需低温保存的产品，一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
6. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
7. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
8. 实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。
备注：由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
