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产品介绍EB-C100 无血清快速细胞冻存液,是一种新型的快速冻存细胞的保护液,可将细胞置于-80℃直接冷 冻保存。EB-C100 内含天然抗冻蛋白(Natural antifreeze protein),不含动物来源的血清成分,能够有 效提高细胞冻存活率和复苏活力,减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全,能够满 足大部分体外培养细胞的冻存需求。
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产品特色即开即用,方便省时、无血清成分,化学成分明确、快速冷冻,可直接置于-80℃冰箱冷冻、高复苏活率,有效保护细胞
目前已验证的细胞:HEK-293,Hela,A549,NCI-H460,MCF-7, HepG2, SK-OV-3, C2C12,CHO, COS7,DU145,MDCK,NIH-3T3,HUVEC, HUSMC, BMSC等50余种。
细胞复苏活率高达 90%以上;
1. 请选择对数生长期细胞进行冻存;
2. 冻存液加入细胞后,请尽快放入-80℃冰箱冻存;
3. 本产品冻存细胞可以在-80℃冰箱保存 3 年以上;
4. 若需长期冻存细胞,请转移至液氮罐中贮存;
5. 冻存液中含 DMSO 成分,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级。请以实际收货标签信息为准。
2-8℃保存。有效期 2 年。
1. 细胞冻存步骤
•收集对数期生长的悬浮细胞或贴壁细胞,离心(1000 ~1500 rpm,3~5 min),去除上清培养液;
•加入适量的细胞冻存液,重悬细胞,调节密度至 1~5×10⁶ cells/mL;
•将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中, 每管 1~2 mL;
•将冻存管直接转移至-80℃冰箱中冷冻保存;
•如需长期保种,请在-80℃条件下保存至少一天后,将冻存管转移至液氮中;
2. 细胞复苏步骤
1. 取出细胞冻存管,将其置于 37℃水浴锅中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞解冻后,将细胞转移至含有 10 mL 培养基的离心管中,1200 rpm,离心 5 min。
3. 弃上清培养基,加入适量的新鲜培养基重悬细胞,并将细胞转移至培养瓶(皿)中,置于 37℃培养 箱中继续培养。
3. 细胞活性检测
•复苏活率检测(台盼蓝法) 方法:将细胞冻存管置于 37℃水浴锅中快速解冻; 取 10 µL 细胞冻存悬液,与 10 µL 的 0.4%台盼蓝溶液混合后,滴加在细胞计数板中,检测活细 胞的比例。 以 Hela 细胞为例,进行冷冻保存,检测其细胞复苏活率。
•细胞冻存稳定性:
图(一). 将细胞重悬在冻存液中,置于-80ºC 条件下保存 1,3,6,12,18,24 个月后,检测细胞的复苏活率。
•冻存液保存稳定性:
在不同的温度条件下,保存冻存液不同的时间后检测其冻存细胞后的复苏活率
•细胞生长观察(镜检法)
细胞于 37℃水浴锅中解冻复苏后,接种于培养皿中,显微镜下观察细胞的形态。