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斑马鱼产品
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基本信息-
产品名称EDTA脱钙液(pH7.2)
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保存温度室温
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有效期1年
产品简介一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
EDTA 是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
EDTA 脱钙液优点:①经 EDTA 脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小;③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。
EDTA 脱钙液缺点:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬。
操作步骤(仅供参考)1. 骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。
2. 组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3. 组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。
4. 组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 10~30 天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。
5. 用蒸馏水冲洗数次。
6. 常规脱水、包埋。
注意事项1. 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可。
2. 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60℃。
3. 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4. 脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
5. 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
6. 我司生产的生化试剂如无特殊标注,基本为非无菌包装,若用于细胞实验,请提前做好预处理。需低温保存的产品,一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
7. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
8. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
9. 实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。
附录脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害,尽量避免用力过大或反复检测。






