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斑马鱼产品
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基本信息-
中文名称组织冰冻切片OCT包埋剂
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保存温度室温
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有效期2年
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性状无色透明粘稠液体,温度降低时逐渐变粘稠并固化
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应用组织和培养细胞的冰冻包埋固定。用于临床快速病理染色诊断、免疫组化、原位杂交
产品简介冷室、组织块、包埋剂、切片刀之间的温度平衡于优化的切片温度(optimum cutting temperature, OCT)附近,是获得高质量冰冻切片的保证。不同的组织因构成各异而具有不同的OCT温度。当冰冻组织在接触刀刃的瞬间,局部温度短暂升高发生局部融化;随后切开的组织薄片暴露于冷室被再次骤冷冰冻。这种融化-冰冻温度变化是切片皱褶或断裂的内在原因,在此基础上切片的软硬度和厚薄度进一步影响皱褶产生。在切片过程中,冰冻包埋剂也须历经与组织类似的温度变化,这就要求包埋剂必须具有与组织块相近的冰冻速度和软硬韧度。冰冻组织切片OCT包埋剂是由高分子聚合物组成的无色透明粘稠液体,骤冷时固化,其冰冻速度和软硬韧度与组织细胞相近,因而能保证优化的OCT温度,并具有支持填充、减少皱褶和断裂等作用。可任意添加于切片机的样品架以支持和固定样品。
产品特点1.支持超薄和超厚(2-100µm)冰冻切片并减少皱褶和断裂;
2.不影响后续免疫组化、原位杂交、病理染色等操作;
3.可经由水或PBS冲洗完全去除,是理想的组织冰冻包埋剂。
操作步骤(仅供参考)使用前标本准备
冰冻切片标本可采用 (1) 新鲜组织,特点是快速,但未用完的包埋组织块不能保存;(2) 使用经典方法10%甲醛或4%多聚甲醛室温 2~10 分钟固定过的组织,优点是既不影响后续步骤,包埋组织块又可长期冰冻保存,随时再用,缺点是步骤稍繁。(3) 培养细胞,800g 离心 10 分钟收集培养细胞,用吸头或针头拨出细胞沉淀块,放入OCT 包埋剂内。
应避免采用降低组织冰点的甲醇乙醇固定。本产品说明书不提供关于组织取材、渗透、固定、冰冻切片等技术信息。用户应阅读冰冻切片机操作手册,参考各种常规技术方法。
使用方法
1. OCT 包埋:用水或 PBS 冲洗固定的组织块,用吸水纸吸去液体。在盛标本的包埋模子内,挤出适量的包埋剂,放入组织和细胞沉淀块,加包埋剂完全埋没组织块。可用 2 层铝箔纸折叠成简易的模子。如有气泡可用针头或吸头吸出。
2. 冰冻:将盛有组织细胞和包埋剂的模子,正置于切片机冷室内冰冻 10 分钟。此时,包埋剂为乳白色固体。包埋剂和组织冷冻时体积略有膨胀,因此模子应正置,由底部向顶部进行冰冻。也可将 OCT 包埋的组织置于干冰或液氮,或放入-40~-70 ºC 冰箱冰冻固化保存,用前取出置于切片机冷室内平衡温度(否则损坏刀)。
3.切片:可在切片机的组织卡盘(chuck)上加少许包埋剂并在其固化前嵌入组织块,然后再于组织周围加入少许包埋剂使其稳定。进行常规切片,厚度范围 2~100 µm。
4. 收片后,用适量水或PBS冲洗切片3次,每次2−3分钟,洗除包埋剂。而后可进行常规组化染色、病理染色、原位杂交。未用完的组织块可冷冻储存。
附表为新鲜组织的冰冻切片OCT温度。固定过的组织的OCT温度升高相应5~10°C
通常折中采用−20°C。肝脑脾等组织的 OCT 切片温度应在−10 ºC,否则易碎。脂肪或含脂肪多的组织的OCT 切片温度更低,否则易皱褶。
注意事项1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
备注:由于产品信息可能会有优化升级,请以实际收货标签信息为准。
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